2020 Eppendorf AG, Germany. All rights reserved, including graphics and
images. No part of this publication may be reproduced without the prior permission of the
copyright owner.
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Eppendorf
and the Eppendorf Brand Design are registered trademarks of Eppendorf AG,
Germany.
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Eppendorf Tubes
and Eppendorf LoBind® are registered trademarks of Eppendorf AG,
Germany.
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Registered trademarks and protected trademarks are not marked in all cases with
Bevor Sie Verbrauchsartikel das erste Mal verwenden, lesen Sie diese
Gebrauchsanweisung und zusätzlich die Bedienungsanleitung des Geräts, mit dem Sie die
Verbrauchsartikel benutzen.
2Allgemeine Sicherheitshinweise
2.1Bestimmungsgemäßer Gebrauch
Eppendorf LoBind Tubes und Plates sind Polypropylen-Einmalartikel zum Aufbereiten,
Mischen, Zentrifugieren, Transportieren und Lagern von festen und flüssigen Proben und
Reagenzien.
Eppendorf Microplates sind für den Einsatz in allen gängigen Plattenreadern geeignet.
Das Produkt kann für Schulungs-, Routine- und Forschungslabore in den Bereichen Life
Sciences, Industrie oder Chemie eingesetzt werden. Das Produkt darf ausschließlich für
Forschungszwecke eingesetzt werden. Für andere Anwendungen leistet Eppendorf keine
Gewährleistung. Das Produkt ist nicht für die Verwendung in diagnostischen oder
therapeutischen Anwendungen bestimmt. Die Verwendung des Produkts erfordert
Fachpersonal, das für die oben genannten Bereiche geschult ist.
2.2Gefährdungen bei bestimmungsgemäßem Gebrauch
WARNUNG! Gesundheitsschädigung durch giftige, radioaktive oder aggressive
Chemikalien sowie durch infektiöse Flüssigkeiten und pathogene Keime.
Beachten Sie die nationalen Bestimmungen zum Umgang mit diesen
Substanzen, die biologische Sicherheitsstufe Ihres Labors sowie die
Sicherheitsdatenblätter und Gebrauchshinweise der Hersteller.
Tragen Sie Ihre persönliche Schutzausrüstung.
Entnehmen Sie umfassende Vorschriften zum Umgang mit Keimen oder
biologischem Material der Risikogruppe II oder höher dem "Laboratory
Biosafety Manual" (Quelle: World Health Organization, Laboratory Biosafety
Manual, in der jeweils aktuell gültigen Fassung).
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Allgemeine Sicherheitshinweise
Eppendorf LoBind® Tubes and Plates
Deutsch (DE)
WARNUNG! Gefahr durch gesundheitsgefährdende Substanzen.
Bei unsachgemäßer Handhabung der Gefäße kann der Gefäßinhalt herausspritzen
oder entweichen.
Verwenden Sie nur unbeschädigte Reaktionsgefäße und Platten.
Befüllen Sie die Reaktionsgefäße und Platten nicht über das zulässige
Gesamtvolumen.
Treffe n Sie bei Tra nsport und Lager ung geeignete Sicherheitsvorkehrungen, die
das Entweichen des Gefäßinhalts verhindern. Verwenden Sie für die
Reaktionsgefäße geeignete Ständer.
Frieren Sie die Reaktionsgefäße und Platten nicht mit flüssigem Stickstoff ein.
Verschließen Sie die Reaktionsgefäße und Platten sorgfältig.
Verwenden Sie für Eppendorf Tubes 5.0 mL einen Clip, wenn das Gefäß über
80 °C erhitzt wird.
Zentrifugieren Sie keine Gefäße, die mit einem Clip verschlossen sind.
WARNUNG! Bei Mischern oder Zentrifugen: Kontaminationsgefahr durch
Gefäße in zu großen Halterungen (Wells, Rotorbohrungen, Becher, Gehänge).
Gefäße können zerstört werden. Der Gefäßinhalt kann freigesetzt werden.
Beachten Sie Höhe und Durchmesser des Gefäßes. Verwenden Sie nur passende
Zentrifugen-Einsätze oder Mischer-Thermoblöcke.
Verwenden Sie ggf. die dafür vorgesehenen Adapter.
WARNUNG! Kontaminationsgefahr durch beschädigte Reaktionsgefäße oder
Platten.
Bei falscher Anwendung können Reaktionsgefäße und Platten zerstört werden. Die
enthaltenden Substanzen werden freigesetzt.
Verschließen Sie die Reaktionsgefäße und Platten sorgfältig.
Zentrifugieren Sie Reaktionsgefäße und Platten nur bis zu den maximal
zulässigen Zentrifugationskräften.
Zentrifugieren Sie gestapelte Platten nur bei niedriger Drehzahl.
Beachten Sie, dass organische Lösungsmittel die mechanische Belastbarkeit der
Gefäße senken können. In Zweifelsfällen wenden Sie sich bitte an den
Eppendorf Application Support ([email protected]).
WARNUNG! Kontaminationsgefahr durch Mehrfachgebrauch.
Verbrauchsartikel sind nur für den Einmalgebrauch vorgesehen.
Entsorgen Sie Verbrauchsartikel nach Gebrauch entsprechend der Substanzen,
mit denen sie in Berührung gekommen sind.
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Allgemeine Sicherheitshinweise
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Eppendorf LoBind® Tubes and Plates
Deutsch (DE)
WARNUNG! Kontaminationsgefahr.
Gefäße sind nur in verschlossener Verpackung steril. Nach fünf Jahren erlischt die
Haltbarkeit auch in verschlossener Verpackung.
Öffnen Sie die Verpackung erst unmittelbar vor dem Gebrauch.
Beachten Sie das aufgedruckte Verfallsdatum.
VORSICHT! Kontaminationsgefahr bei der Entsorgung gebrauchter
Verbra uchs arti kel.
Entsorgen Sie gebrauchte Verbrauchsartikel entsprechend der Substanzen, mit
denen sie in Berührung gekommen sind.
Berücksichtigen Sie die für Ihr Labor erlassenen Vorschriften.
ACHTUNG! Materialveränderung von Verbrauchsartikeln bei extremen
Tem pera tur en.
Extreme Temperaturen (z. B. beim Tiefkühlen oder Autoklavieren) beeinflussen das
Material. Mechanische Festigkeit, Maße und Form des Verbrauchsartikels ändern
sich.
Verwenden Sie Verbrauchsartikel, die für den gewählten Temperaturbereich
und das gewählte Verfahren geeignet sind.
ACHTUNG! Sachschäden durch falsche Anwendung.
Setzen Sie das Produkt nur für den in der Bedienungsanleitung beschriebenen
bestimmungsgemäßen Gebrauch ein.
Achten Sie auf eine ausreichende Materialbeständigkeit bei der Anwendung von
chemischen Substanzen.
Wenden Sie sich in Zweifelsfällen an den Hersteller dieses Produktes.
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Eppendorf LoBind® Tubes and Plates
Produktbeschreibung
Deutsch (DE)
3Produktbeschreibung
3.1Eppendorf LoBind Tubes und Plates
Eppendorf LoBind Tubes und Plates werden aus einem speziellen Polymer hergestellt. Das
LoBind-Material verbessert die Rückgewinnungsrate der Proben. Die Gefäße sind
zertifiziert frei von humaner DNA, DNase, RNase und PCR-Inhibitoren (PCR clean).
Eppendorf LoBind Tubes und Plates gibt es in folgenden Produktvarianten:
• Eppendorf Protein LoBind für die Aufbereitung oder Lagerung von Protein-, Peptid-,
Antikörper- oder Virusproben.
• Eppendorf DNA LoBind für DNA- oder RNA-Anwendungen in der forensischen
Analyse, für Microarrays und Next-Generation-Sequencing.
Eppendorf LoBind Tubes sind in vier Größen (0,5/1,5/2,0/5,0 mL) erhältlich.
Eppendorf LoBind Tubes sind mit einer Graduierung als Anhaltspunkt für die Füllmenge
und einem Beschriftungsfeld ausgestattet.
Abb. 3-1:Gefäße im 1,5/2,0 mL und im 5,0 mL Tu be Rack
Abb. 3-1: Gefäße im 1,5/2,0 mL und im 5,0 mL Tube Rack
Die Eppendorf LoBind Plates sind als Eppendorf Deepwell Plates und Eppendorf
Microplates erhältlich (siehe Bestellinformationen).
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Applikationen
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Eppendorf LoBind® Tubes and Plates
Deutsch (DE)
4Applikationen
DNA LoBind Tubes sind nicht zur Durchführung von Polymerase-Kettenreaktionen
(PCR) oder verwandten Amplifikationsreaktionen geeignet.
Bei Einsatz von Protein LoBind Tubes können sich die Evaporationszeiten
verlängern. Das Ausspülen der Gefäße mit z. B. Wasser oder Puffer vor der
Anwendung verbessert die Evaporationseigenschaften.
MALDI-Anwendungen: Je nach Arbeitsprotokoll kann eine Aufreinigung (z.B. mit
C-18 Tips) vor dem Kristallisierungsschritt oder am Ende der Probenaufbereitung
erforderlich sein.
4.1Eppendorf DNA LoBind Tubes und Plates
4.1.1 Inkubation von DNA
DNA (830 bp) wurde in zwei Pufferlösungen gelöst.
• 0,1 M NaCl/TE Puffer (Standardbedingung)
• 2,5 M NaCl/TE Puffer (Hochsalzbedingung)
Die jeweilige DNA-Lösung (0,1 ng/μL) wurde bei 37 °C für 24 Stunden in zwei
unterschiedlichen Platten (384-well Deepwell Plates aus Standardmaterial und Deepwell
Plates aus Eppendorf DNA LoBind Material) inkubiert.
Nach Entnahme der Lösung wurde mittels real-time PCR die DNA-Konzentration
bestimmt und daraus die Rückgewinnungsrate (in Prozent) ermittelt.
Standardbedingungen
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
Rückgewinnungsrate [%]
0
DNA Lo Bind Standard materia l
100
Rückgewinnungsrate [%]
Hochsalzbedingungen
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
DNA LoBind Standardmaterial
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Eppendorf LoBind® Tubes and Plates
Applikationen
Deutsch (DE)
4.1.2 Inkubation von rRNA
Eine 100 ng/mL rRNA-Lösung in TE-Puffer wurde bei Raumtemperatur in Gefäßen aus
Standardmaterial und DNA LoBind Gefäßen inkubiert. Nach 24 Stunden wurden die
RNA-Lösungen aus den Gefäßen in eine Messplatte überführt und mit dem RiboGreen
Reagenz gefärbt. Aus den Messergebnissen wurde die Rückgewinnung ermittelt.
9
100
90
80
70
60
50
40
30
20
Rückgewinnungsrate [%]
10
Inkubation von RNA
0
DNA Lo Bind Standard material
4.1.3 Herstellung und Lagerung von Standardansätzen in der real-time PCR
liquots serieller Verdünnungen einer Standardreihe für real-time PCR wurden in
A
verschiedenen Gefäßen hergestellt und gelagert. Bei Verwendung von Eppendorf DNA
LoBind Tubes wurde eine höhere Amplifikationseffizienz im Vergleich zu entsprechenden
Gefäßen eines anderen Herstellers festgestellt.
Quelle: M Lecerf, J. Le Goff, Université Paris, Paris, Frankreich (Eppendorf Application Note
No. 226)
4.1.4 Extraktion von RNA
In Eppendorf DNA LoBind Tubes wurde aus microdisseziertem Hautgewebe RNA isoliert.
Dabei wurde in Kombination mit dem eingesetzten Extraktionskit eine hohe
RNA-Ausbeute erzielt.
Quelle: Dr. C. Kruse, Institut für Medizinische Molekularbiologie, Universität Lübeck,
D-Lübeck
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Applikationen
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Eppendorf LoBind® Tubes and Plates
Deutsch (DE)
4.2Eppendorf Protein LoBind Tubes und Plates
4.2.1 Inkubation von Proteinen bei unterschiedlichen Temperaturen
Die Wiederfindungsrate von Proteinen wurde über Fluoreszenzmessung nach Inkubation
von Fluorescein-markiertem BSA bei Raumtemperatur und 4°C bestimmt. Hierzu wurde
Fluorescein-markiertes BSA (1 μg/mL) in 384-well Microplates aus Standardmaterial und
Protein LoBind Material für 24 Stunden inkubiert. Zu verschiedenen Zeiten wurden
Proben entnommen und die Fluoreszenzintensität ermittelt.
Rückgewinnungsrate [%]
100.00
90.00
80.00
70.00
60.00
50.00
40.00
30.00
20.00
10.00
0.00
Inkubation von Proteinen
Protein LoBind (R T)
Protein LoBind (4 °C )
Standardmat erial (RT)
Standardmat erial (4 °C)
1 3 5 24
Inkubationszeit [h]
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0
20
40
60
80
100
120
45,67,5
Rückgewinnungsrate [ %]
pH-Wert der Lösung
Inkubation von Protein bei unterschiedlichen pH-Werten
Standardreaktionsgefäß
ohne Spülen
Standardreaktionsgefäß
nach 1x Spülen
Protein LoBind Tube /
ohne Spülen
Protein LoBind Tube /
nach 1x Spülen
Applikationen
Deutsch (DE)
4.2.2 Inkubation von Proteinen bei unterschiedlichen pH Werten
131
I markiertes BSA (1 μg/ml) wurde in 0,1 M Acetat, pH 4 bzw. pH 5,6 und in 0,1 M
Mit
Tris, pH 7,5 gelöst und bei 20°C für 24 Stunden in Eppendorf Protein LoBind Tubes und
Standardreaktionsgefäßen inkubiert. Anschließend wurden die Lösungen entnommen und
die Gefäße mit oben beschriebenen Lösungen ohne BSA befüllt. Die Radioaktivität der
Gefäße und Lösungen wurde direkt und nach 1x Spülen der Gefäße gemessen.
Quelle: Dr. M. Badertscher, Omnimedica AG, CH-Schlieren
4.3Literaturverzeichnis
4.3.1 Eppendorf Application Notes
®
Nr. 180: Eppendorf LoBind
: Bewertung der Proteinrückgewinnung in Eppendorf Protein
LoBind Tubes und Plates
®
Nr. 226: Einsatz von Eppendorf LoBind
Lagerung von Standardansätzen für die absolute Quantifizierung mittels real-time PCR
4.3.2 Referenzen
Eine umfangreiche Referenzliste von Veröffentlichungen, in denen "Eppendorf
LoBind Tubes und Plates" bei diversen Laborprotokollen eingesetzt worden sind,
finden Sie im Download-Bereich der jeweiligen Eppendorf LoBind-Produktseite auf
unserer Internetseite www.eppendorf.com
Tubes zur einheitlichen Herstellung und
.
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Technische Daten
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Eppendorf LoBind® Tubes and Plates
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5Technische Daten
MaterialPolypropylen
Lagerung vor GebrauchVor Sonnen- und UV-Licht schützen. Bei
Umgebungstemperatur trocken lagern.
ChemikalienbeständigkeitDie Reaktionsgefäße und Platten weisen eine hohe
Beständigkeit gegen UV-Licht und Chemikalien auf.
Vgl. Applikation Nr. 56: "Das beste Material für
original Eppendorf Tubes
®
und Plates: Eigenschaften
und Chemikalienbeständigkeit von Polypropylen"
Einsatztemperatur-86 °C – 100 °C
• Eppendorf Tubes 5.0 mL
≤ 80 °C
(ohne Clip)
• Eppendorf Tubes 5.0 mL
≤ 100 °C
(mit einem Clip verschlossen)
Autoklavierbarkeitim geöffneten Zustand bei 121 °C, 20 min
Zeichnungen mit den Produktmaßen finden Sie im Download-Bereich der
jeweiligen Eppendorf Produktseite auf unserer Internetseite www.eppendorf.com
Informationen zu geeigneten Verschlussoptionen von Platten finden Sie auf
unserer Internetseite www.eppendorf.com
.
5.1Zentrifugationsbeständigkeit
Die Zentrifugationsbeständigkeit von Verbrauchsartikeln ist generell abhängig von
folgenden Bedingungen:
• Eigenschaften des Verbrauchsartikels (z. B. Material, Form)
• Kombination aus Zentrifuge und Rotor und gegebenenfalls Adapter
• Passgenauigkeit des Verbrauchsartikels in Rotorbohrung oder Adapter
• Physikalische und chemische Eigenschaften der zentrifugierten Flüssigkeit
.
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Eppendorf LoBind® Tubes and Plates
Technische Daten
Deutsch (DE)
Um die passenden Bedingungen für Ihre Anwendung zu bestimmen, führen Sie einen
Probelauf durch.
ACHTUNG! Verbrauchsartikel erwärmen sich.
In ungekühlten Zentrifugen kann je nach Laufzeit, g-Zahl (rcf)/Drehzahl und
Umgebungstemperatur die Temperatur in Rotorraum, Rotor und Probe auf über
40 °C steigen.
Beachten Sie die dadurch abnehmende Zentrifugationsbeständigkeit der
Reaktionsgefäße und Platten.
Beachten Sie die Temperaturbeständigkeit der Proben.
Die mechanische Belastbarkeit der Gefäße wird durch den Einsatz organischer
Lösungsmittel reduziert. In Zweifelsfällen wenden Sie sich an den Eppendorf
Application Support.
Die Gefäße können mit den in untenstehender Tabelle aufgeführten maximalen
g-Zahlen (rcf) bei folgenden Bedingungen zentrifugiert werden:
• Eppendorf LoBind Tubes in einem 45°-Festwinkelrotor
• Eppendorf LoBind Plates in einem Ausschwingrotor
• 40 °C Probentemperatur mit wässriger Salzlösung
• 90 min Zentrifugationsdauer
GefäßProtein LoBindDNA LoBind
Eppendorf LoBind Tubes0,5 mL18 000 × g30 000 × g
1,5 mL18 000 × g30 000 × g
2,0 mL18 000 × g25 000 × g
5,0 mL25 000 × g25 000 × g
Eppendorf Deepwell Plates6 000 × g6 000 × g
Eppendorf Microplates6 000 × g6 000 × g
Zusätzlich zu internen Prozesskontrollen wird jede Charge der Produkte, die mit den
Reinheitsgraden Sterile, Protein-free, PCR clean oder Biopur versehen sind, durch ein
akkreditiertes externes Labor geprüft und zertifiziert.
Chargenbezogene Zertifikate im Internet unter: www.eppendorf.com/certificates
6Bestellinformationen
6.1Protein LoBind Plates
Best.-Nr.
(International)
0030 624.300951040589Protein LoBind
0030 504.3050030504305Protein LoBind
0030 504.208951032905Protein LoBind
0030 504.100951032107Protein LoBind
0030 524.101951031305Protein LoBind
Best.-Nr.
(Nordamerika)
Beschreibung
Microplate 384/V-PP
80 Platten, Wells klar, Rahmen weiß
Eppendorf Deepwell Plate 96/2000 μL
20 Platten, Wells klar, Rahmen weiß
Eppendorf Deepwell Plate 96/1000 μL
20 Platten, Wells klar, Rahmen weiß
Eppendorf Deepwell Plate 96/500 μL
40 Platten, Wells klar, Rahmen weiß
Eppendorf Deepwell Plate 384/200 μL
40 Platten, Wells klar, Rahmen weiß
.
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Eppendorf LoBind® Tubes and Plates
Bestellinformationen
6.2DNA LoBind Plates
Best.-Nr.
(International)
0030 603.3030030603303DNA LoBind
0030 623.304951040546DNA LoBind
0030 503.201951032808DNA LoBind (auch für RNA und andere
0030 503.104951032000DNA LoBind (auch für RNA und andere
0030 523.105951031208DNA LoBind (auch für RNA und andere