Roth Tryptone Soy Agar User guide

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TRYPTON-SOJA-AGAR (TSA)

Zur Detektion und Zählung von E. coli und anderen coliformen Bakterien in Lebensmitteln
und Wasserproben. Nichtselektiver Agar zur Subkultivierung für den Oxidasetest
Nach EN ISO 9308-1:2000
CP70

Zusammensetzung in g/l:

Casein, tryptisch verdaut ............................................... 15,0

Sojapepton ....................................................................... 5,0

Natriumchlorid .................................................................. 5,0

Agar ............................................................................... 15,0

pH-Wert..................................................................... 7,20,1

HERSTELLUNG (EN ISO 9308-1:2000 – B.3)

40 g des Mediums werden in 1 l destilliertem Wasser suspendiert. Zum Lösen unter Rühren er hit zen.
In 200 ml Aliquots abfüllen und für 15 Minuten im Autoklaven bei 121°C sterilisieren. Auf ca. 50 °C
abkühlen lassen und in Petrischalen gießen, so dass eine etwa 5 mm dicke Agarschicht entsteht.
Erstarren lassen. Zweischichtige Agarplatten zum Schnelltest auf E. coli werden hergestellt indem man
eine dünne Schicht (ca. 1 mm) TSA-Agar über fertige TBA-Platten (Best. Nr. CP69.1) gießt.
Für jede Untersuchung frisch herstellen.

EINSATZGEBIET

Trypton-Soja-Agar wird vorgegeben von der Europäischen ISO Norm 9308-1:2000 zur Untersuchung von
Wasserproben auf die Anwesenheit von coliformen Bakterien. Nach Membranfiltration und Kultur der Proben
auf Lactose-TTC-Agar mit Natrumheptadecylsulfat (Best. Nr. CP65.1) werden Subkulturen aller gelben bis
orangefarbenen Kolonien mit gelbem Hof auf Trypton-Soja-Agar angelegt. Nach Bebrütung werden die
Kolonien durch Oxidasetest auf einem Filterpapier analysiert. Oxidase-negative Kolonien werden als
coliforme Bakterien gezählt. Zum Schnelltest auf E. coli wird die filtrierte Membran direkt auf der TSA­Agarplatte oder auf einer zweischichtigen TSA/TBA Kombinationsplatte inkubiert. Coliforme Bakterien sind
Gram-negative, stäbchenförmige Bakterien, die keine taxonomische Gruppe darstellen, sondern durch die
Eigenschaft charakterisiert sind, aus Lactose unter Säure und Gasbildung Energie gewinnen zu können. Sie
kommen vor allem im Darm von Warmblütern vor, können allerdings auch einige Zeit außerhalb der
natürlichen Umgebung überleben und sind damit bestens geeignet zur Untersuchung von Wasserproben auf
fäkale Verunreinigungen. Allerdings leben einige coliforme Bakterien auch im Boden und in
Oberflächenwassern, so dass eine entsprechende Verunreinigung von Wasserproben auch auf andere
Fehler in der Wasseraufbereitung zurückzuführen sein kann.
Die Europäische ISO Norm 9308-1:2000 legt ein Referenzverfahren fest für den Nachweis und die Zählung
von coliformen Bakterien in jedem Wasser für den menschlichen Gebrauch. Vorgegeben werden zwei
Verfahren – ein Standardtest, der besonders für keimarmes Wasser geeignet ist und ein Schnellverfahren
zur kurzfristigen, aber weniger sensitiven Analyse.

MIKROBIOLOGISCHE TESTS

Die folgenden Ergebnisse wurden erzielt nach Inkubation von Referenzstämmen im angegebenen Agar bei
einer Temperatur von 36 ± 2 °C für 18-24 Stunden.

Mikroorganismen

Wachstum

Escherichia coli ATCC 25922

Gut

Klebsiella pneumoniae ATCC 13833

Gut

TRYPTON-SOJA-AGAR (TSA) 500 g CP70.1

1 kg CP70.2

Carl Roth GmbH + Co. KG

Schoemperlenstraße 3-5 • 76185 Karlsruhe • Postfach 100121 • 76231 Karlsruhe
Telefon: [phone] • Fax: [phone] • [email protected] • www.carlroth.de

Die Firma ist eine Kommanditgesellschaft mit Sitz in Karlsruhe, Reg. Gericht Mannheim HRA 100055. Persönlich haftende Gesellschafterin ist die Roth Chemie GmbH
mit Sitz in Karlsruhe, Reg. Gericht Mannheim HRB 100428. Geschäftsführer: André Houdelet sse 07/2021

Produkt-Datenblatt

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TRYPTONE SOY AGAR (TSA)

For detection and enumeration of E. coli and other coliform bacteria in foods and water
samples. Non-selective agar for subculturing prior to oxidase tests
Acc. EN ISO 9308-1:2000
CP70

Formulation in g/l:

Casein, tryptic digest ........................................... 15.0

Soy peptone ........................................................... 5.0

Sodium chloride ..................................................... 5.0

Agar ..................................................................... 15.0

Final pH........................................................... 7.20.1

PREPARATION (EN ISO 9308-1:2000 – B.3)

Suspend 40 g of the medium in 1 l distilled water. Solubilise under heating with frequent agitation.
Pour aliquots of 200 ml each and sterilise for 15 minutes at 121 °C in an autoclave.
Let cool to approx. 50 °C and pour into Petri dishes (at approx. 5 mm thickness). Let cool.
Double layer agar plates for speedy testing of E. coli are produced by pouring a thin layer (approx.
1 mm) of TSA-agar over ready-to-use TBA-plates (Art. No. CP69.1). Prepare freshly for each test.

USES

Tryptone Soy Agar is prescribed by European ISO Standard 9308-1:2000 for analyzing water samples to
determine the presence of coliform bacteria. After filtering the membranes and culturing the samples on
TTC-Chapman-Agar with Sodium Heptadecylsulphate (Art. No CP65.1), subculture all yellow to orange­coloured colonies with a yellow corona on Tryptone Soy Agar. Analyze the colonies with an oxidase test on
filter paper after incubation. Oxidase-negative colonies should be counted as coliform bacteria. For a quick
E. coli test, place the filtered membrane directly on the TSA-agar plates or on a double layer TSA/TBA
combination plate. Coliform bacteria are Gram negative, rod-shaped bacteria which do not represent a
taxonomic group, but are characterized for being able to produce energy from lactose under acid and
aerosis. They are prevalent particularly in the intestines of warm-blooded animals. They can, however,
survive for a time outside their natural environment and are therefore extremely suitable for analyzing water
samples for faecal contamination. However, some types of coliform bacteria do in fact live in the soil and in
surface waters with the result that the respective contamination of the water samples may be ascribed to
other errors during treatment of water.
European ISO Standard 9308-1:2000 defines reference procedures for the detection and enumeration of
coliform bacteria in all types of water meant for human use. Two procedures are given – a standard test
which is especially suitable for water low in germs and a quick-test for short term but less sensitive analysis.

MICROBIOLOGICAL TEST

The following results were obtained in the performance of the given medium from type cultures after
incubation at a temperature of 36 ± 2 °C and observed after 18-24 hours.

Microorganisms

Growth

Escherichia coli ATCC 25922

Good

Klebsiella pneumoniae ATCC 13833

Good

TRYPTONE SOY AGAR (TSA) 500 g CP70.1

1 kg CP70.2

Carl Roth GmbH + Co. KG

Schoemperlenstraße 3-5 • 76185 Karlsruhe • P.O. Box 100121 • 76231 Karlsruhe
Phone: [phone] • Fax: [phone] • [email protected] • www.carlroth.com

The company is a limited partnership with headquarters in Karlsruhe, reg. court Mannheim HRA 100055. Roth Chemie GmbH, with headquarters in Karlsruhe,
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Product Data Sheet