
Mannit-Kochsalz-Agar
Empfohlen nach der Harmonisierten Methode (Ph. Eur. 6.0), Ph. Eur. 6.3 und 7.0
Chapman-Agar. Zur Isolierung pathogener Staphylokokken aus Lebensmitteln,
klinischen und andern Proben.
Ph. Eur. / ISO 22718 / für die Mikrobiologie
CL81
Zusammensetzung in g/l:
Pankreashydrolysat aus Casein ................................ 5,0
Pepton (peptischer Verdau aus Tiergewebe) ........... 5,0
Rindfleischextrakt ....................................................... 1,0
Natriumchlorid ........................................................... 75,0
D-Mannit .................................................................... 10,0
Phenolrot ................................................................. 0,025
Agar ........................................................................... 15,0
pH-Wert........................................................... 7,4 ± 0,2
HERSTELLUNG
111 g des Mediums werden in einem Liter destillierten Wasser suspendiert. Man mische gut und erhitze
unter häufigem Rühren/Schütteln, bis das Medium vollständig gelöst ist und lasse eine Minute lang kochen.
Man sterilisiere 15 Minuten lang bei 121 °C und gieße in Petrischalen.
EINSATZGEBIET
Mannit-Kochsalz-Agar ist ein Medium, das nach den Angaben von Chapman zur Isolation von mutmaßlich
pathogenen Staphylokokken (Chapman, 1945, J. Bact. 50:201-3). Es stellt ein hochselektives Medium dar,
auf dem auch große Probenmengen ausgestrichen werden können.
Die hohe Konzentration an Natriumchlorid in dieser Formulierung inhibiert das Wachstum der meisten
anderen Bakterien. Durch den Abbau von Mannitol durch Mannitol-fermentierende pathogene
Staphylokokken wird das Medium sauer und wechselt die Farbe von Pink nach Gelb. Mannitolfermentierende pathogene Staphylokokken wachsen also in meist großen Kolonien, die von einem gelben
Hof umgeben sind. Kolonien nicht-pathogener Staphylokokken wachsen als meist kleine Kolonien, die von
einem roten oder purpurfarbenen Hof umgeben sind. Zur Bestätigung dieser Kolonien als pathogener
Staphylococcus durch die Detektion der Lipase-Aktivität empfehlen wir die Zugabe von 5 % Eigelbemulsion
(Best.-Nr. 0402.1) zum Agar. Die Lipaseaktivität resultiert in einem gelb-opaken Hof um die Kolonien von
Lipase-produzierendem Staphylococcus.
MIKROBIOLOGISCHE TESTS
Die folgenden Ergebnisse wurden erzielt nach Inkubation von Referenzstämmen im angegebenen
Medium / Agar bei einer Temperatur von 30-35 °C für 18 - 72 Stunden.
Escherichia coli ATCC 25922
Escherichia coli ATCC 8739
Enterobacter aerogenes ATCC 13048
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Staphylococcus aureus ATCC 6538
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Staphylococcus epidermidis ATCC 14990
Mannit Kochsalz Agar 500 g CL81.1
Staphylococcus aureus
ATCC 25923
Carl Roth GmbH + Co. KG
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Mannitol Salt Agar
Recommended by the Harmonized Method (Ph. Eur. 6.0), Ph. Eur. 6.3, and 7.0
Chapman Agar. For isolation of pathogenic Staphylococci from foods,
clinical and other samples.
Ph. Eur. / ISO 22718 / for Microbiology
CL81
Formulation in g/l:
Pancreatic digest of Casein ........................................ 5.0
Peptone (peptic digest of animal tissue) ..................... 5.0
Beef extract.................................................................. 1.0
Sodium chloride ......................................................... 75.0
D-Mannitol ................................................................. 10.0
Phenol red ............................................................... 0.025
Agar ........................................................................... 15.0
Final pH ........................................................ 7.4 ± 0.2
PREPARATION
Suspend 111 g of the medium in one liter of distilled or deionized water. Mix well. Heat with frequent agitation
until complete dissolution. Boil for one minute and sterilize at 121 ºC for 15 minutes.
Pour intro Petri dishes.
USES
Mannitol Salt Agar is a medium prepared according to the recommendations of Chapman for the isolation of
presumptive pathogenic Staphylococci (Chapman, 1945, J. Bact. 50:201-3). It is a highly selective medium,
onto which large samples may be streaked without danger of overgrowth.
The high concentration of sodium chloride included in this formulation inhibits growth of most of the other
bacteria. Through degradation of mannitol by the mannitol fermenting pathogenic staphylococci, the medium
is acidified and changes in colour from pink to yellow. Thus, mannitol fermenting pathogenic staphylococci
grow in mostly large colonies surrounded by a yellow zone, colonies of non-pathogenic staphylococci appear
as mostly small colonies surrounded by a red or purple zone. In order to confirm the colonies as pathogenic
Staphylococcus through detection of lipase activity, we recommend addition of 5 % egg yolk emulsion (Art.
No. 0402.1). Lipase activity results in a yellow opaque zone around the colonies of staphylococci producing
this enzyme.
MICROBIOLOGICAL TEST
The following results were obtained in the performance of the given medium from type cultures after
incubation at a temperature of 30 - 35 °C and observed after 18 - 72 hours.
Escherichia coli ATCC 25922
Escherichia coli ATCC 8739
Enterobacter aerogenes ATCC 13048
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Staphylococcus aureus ATCC 6538
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
Staphylococcus epidermidis ATCC 14990
Mannitol Salt Agar 500 g CL81.1
Staphylococcus aureus
ATCC 25923
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