Roth MRS Agar, X924 User guide

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MRS AGAR
Zusammensetzung in g/l (angenähert):
Pepton .......................................... 10.0
Hefeextrakt ..................................... 4.0
Tween 80 ........................................ 1.0
Natriumacetat .................................. 5.0
Magnesiumsulfat ............................ 0.2
Rindfleischextrakt ............................. 8.0
Glucose ......................................... 20.0
Dikaliumphosphat ........................... 2.0
Ammoniumcitrat .............................. 2.0
Mangansulfat ................................ 0.05
Agar .............................................. 10.0
pH ......................................... 6,2 ± 0,2
HERSTELLUNG
62 g des Mediums werden in einem Liter destillierten Wassers suspendiert. Gut mischen. Man erhitze bis zum Kochen, um das Medium vollständig zu lösen. Man gebe die Lösung in geeignete Behälter und sterilisiere 12 Minuten lang bei 121°C.
EINSATZGEBIET
MRS Agar wurde von deMan, Rogosa und Sharpe entwickelt, um alle Stämme von Lactobacilli zu kultivieren, insbesondere die anspruchsvollen, langsamer wachsenden Typen wie L. brevis und L. fermenti. Das Medium ist geeignet zur Kultur von Milchsäurebakterien im allgemeinen, einschließlich Lactobacillus, Streptococcus, Pediococcus und Leuconostoc. Ammoniumcitrat inhibiert bei niedrigem pH die meisten Mikroorganismen, einschließlich anderer Streptokokken und Schimmelpilze. Es erlaubt das Wachstum von Lactobacillus, aber es unterbindet das Ausschwärmen im Allgemeinen. Lactobacilli sind mikroaerophyl und erfordern normalerweise ein Ausstreichen auf zwei Schichten. Die Oberflächenkolonien oder die eingebetteten Kolonien sind normalerweise klein, trüb und weiß, dicht und federig. Die Platten werden gegossen, indem zuerst 1 ml des vorher gelösten Musters auf eine sterile Petrischale gegossen wird und dann das abgekühlte Medium (45-50 °C) zugefügt wird. Nach Festwerden wird eine zweite Schicht gegossen. Die Platten werden 3 Tage lang bei 35 °C, oder besser 5 Tage lang bei 30 °C inkubiert. Es ist wichtig, dass für eine feuchte Atmosphäre gesorgt wird, da die Platten während der Inkubation unter 5 % CO2 nicht austrocknen sollten.
MIKROBIOLOGISCHE TESTS
Die folgenden Ergebnisse wurden erzielt nach Inkubation von Referenzstämmen im angegebenen Medium / Agar bei einer Temperatur von 35 ± 2 °C für 48 h und 5 Tage.
Mikroorganismen
Wachstum
Lactobacillus acidophilus ATCC 4356
Gut
Lactobacillus casei ATCC 393
Gut
Escherichia coli ATCC 25922
Gemäßigt-Gut
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Gehemmt
Nach: deMan, J.D., Rogosa M., und Sharpe M.E. (1960) A Medium for the Cultivation of Lactobacilli. J. Appl. Bact. 23:130-135
MRS AGAR 100 g X924.5 500 g X924.1 1 kg X924.2 2,5 kg X924.3 5 kg X924.4
Lagerung bei 4 °C
Produkt-Datenblatt
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MRS AGAR
For the general cultivation of lactobacilli
X924
Approximate formula in g/l:
Peptone ........................................... 10.0
Yeast Extract ..................................... 4.0
Tween 80 ........................................... 1.0
Sodium Acetate ................................. 5.0
Magnesium Sulphate ........................ 0.2
Beef Extract ....................................... 8.0
Glucose ........................................... 20.0
Dipotassium Phosphate .................... 2.0
Ammonium Citrate............................. 2.0
Manganese Sulphate ...................... 0.05
Agar ................................................. 10.0
pH ............................................. 6.2 ± 0.2
PREPARATION
Suspend 62 g of the medium in one liter of deionized or distilled water. Mix well. In order to dissolve the medium completely heat to boiling. Dispense and sterilize at 121 C for 12 minutes.
USES
MRS Agar was developed by deMan, Rogosa and Sharpe to grow luxuriantly all strains of lactobacilli especially the fastidious, slower-growing types such as L. brevis and L. fermenti. The medium is apt for the growth of lactic acid bacteria, including Lactobacillus, Streptococcus, Pediococcus and Leuconostoc. Ammonium citrate at a low pH inhibits most microorganisms, including other Streptococci and molds. It allows for the growth of Lactobacillus, but limits swarming in general. Lactobacilli are microaerophilic and generally require plating of two layers. The surface colonies or the embedded colonies usually are small, opaque and white, dense and feathery. The pour plate method deposits 1 ml of the previously diluted sample into a sterile Petri dish and the cooled (45-50 C) medium is added. After solidification, a second layer is poured. The plates are incubated at 35 C for 3 days or better, at 30 C for 5 days. It is important to maintain a humid atmosphere because the plates should not dry out during incubation which is in 5 % CO2.
MICROBIOLOGICAL TEST
The following results were obtained in the performance of the given medium from type cultures after incubation at a temperature of 35 ± 2 °C and observed after 48 hours and after 5 days.
Microorganisms
Growth
Lactobacillus acidophilus ATCC 4356
Good
Lactobacillus casei ATCC 393
Good
Escherichia coli ATCC 25922
Moderate-Good
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Inhibited
Acc. to: deMan, J.D., Rogosa M., und Sharpe M.E. (1960) A Medium for the Cultivation of Lactobacilli. J. Appl. Bact. 23:130-135
MRS AGAR 100 g X924.5 500 g X924.1 1 kg X924.2
2.5 kg X924.3 5 kg X924.4
Storage at 4 °C
Product Data Sheet
Carl Roth GmbH + Co. KG
Schoemperlenstraße 3-5 • 76185 Karlsruhe • P.O. Box 100121 • 76231 Karlsruhe Phone: +49 (0) 721/ 5606-0 • Fax: +49 (0) 721/ 5606-149 • [email protected] • www.carlroth.com
The company is a limited partnership with headquarters in Karlsruhe, reg. court Mannheim HRA 100055. Roth Chemie Gm bH, with headquarters in Karlsruhe, reg. court Mannheim HRB 100428, is the personally liable partner. Managing Director: André Houdelet. Sales tax identification number: DE 143621073. sse 07/2021
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