Page 1
COLIFORME CHROMOGENER-AGAR
Zur selektiven Anreicherung und gemeinsamen Detektion von E. coli und anderen
Coliformen in Wasser- und Lebensmittelproben
CL45
Zusammensetzung in g/l (angenähert):
Natriumchlorid ....................................................................... 5,0
Phosphatpuffer ...................................................................... 4,9
Pepton ................................................................................... 3,0
Natriumpyruvat ...................................................................... 1,0
Tryptophan ............................................................................ 1,0
Sorbitol ................................................................................... 1,0
Chromogene ........................................................................ 0,36
Natriumheptadecylsulfat (Tergitol-7) ..................................... 0,1
Agar ..................................................................................... 10,0
pH-Wert ................................................................... 6,8 ± 0,2
HERSTELLUNG
26,4 g des Mediums werden in 1 l destilliertem Wasser suspendiert. Zum Lösen unter Rühren erhitzen und ca. 1 min.
aufkochen lassen. Leicht abkühlen lassen und in Petrischalen gießen. Kühl und dunkel (ca. 6 °C) aufbewahren.
NICHT AUTOKLAVIEREN. NICHT ÜBERHITZEN.
Auch geeignet für die Membran-Filter-Methode
EINSATZGEBIET
Coliforme Chromogener-Agar wird verwendet zur Identifikation und Detektion von coliformen Bakterien und E. coli in Wasser- und
Lebensmittelproben. Die spezielle Komposition des Mediums mit Pepton, Sorbitol, etc., garantiert ein schnelles Koloniewachstum,
auch von infektiösen Coliformen.
Natrumheptadecylsulfat (Tergitol 7) inhibiert Gram-positive Bakterien und die Ausbreitung von Proteus. Das Medium enthält
Tryptophan, so dass bei Bedarf Kolonien auf Indolproduktion getestet werden können, um somit die Eigenschaft als E. coli nach
Trinkwasserverordnung nachzuweisen.
Nach Bebrütung werden die Kolonien auf Pigmentbildung analysiert. Die Chromogenmischung enthält als chromogene Substrate
Salmon-gal und X-Glucuronid, die von coliformeneigenen Enzymen (Galactosidase, Glucuronidase) umgesetzt werden und somit
über die Farbbildung die Identifikation ermöglichen (s.u.). Die -D-Galactosidase der Coliformen im Allgemeinen schneidet das
Salmon-gal Substrat und erzeugt somit eine lachsfarbene bis rote Farbe in Kolonien von coliformen Bakterien. Die -DGlucuronidase der E. coli Bakterien schneidet beide Substrate (Salmon-gal und X-Glucoronid) und resultiert in einer blauen bis
dunkel-violetten Farbe der E. coli Bakterien, die man so leicht von den anderen Coliformen unterscheiden kann. Da es sich nicht
um ein streng-selektiv Medium handelt, wachsen auch andere Gram-negative Bakterien wie z.B. Salmonellen oder
Pseudomonaden, die an den farblosen Kolonien zu erkennen sind.
Coliforme Bakterien sind Gram-negative, stäbchenförmige Bakterien, die keine taxonomische Gruppe darstellen, sondern durch
die Eigenschaft charakterisiert sind, aus Lactose unter Säure und Gasbildung Energie gewinnen zu können. Sie kommen vor
allem im Darm von Warmblütern vor, können allerdings auch einige Zeit außerhalb der natürlichen Umgebung überleben und sind
damit bestens geeignet zur Untersuchung von Wasserproben auf fäkale Verunreinigungen. Allerdings leben einige coliforme
Bakterien auch im Boden und in Oberflächenwassern, so dass eine entsprechende Verunreinigung von Wasserproben auch auf
andere Fehler in der Wasseraufbereitung zurückzuführen sein kann.
MIKROBIOLOGISCHE TESTS
Die folgenden Ergebnisse wurden erzielt nach Inkubation von Referenzstämmen bei einer Temperatur von 35±2 °C für 18-24
Stunden. Bitte beachten Sie: Der E. coli Stamm O157:H7 ist -Glucuronidase negativ und bildet lachsfarbene Kolonien.
Mikroorganismen
Wachstum
Koloniefarbe
Escherichia coli ATCC 25922 (Abb. A und B)
Gut
Blau - Violett
Escherichia coli ATCC 11775
Gut
Blau - Violett
Citrobacter freundii ATCC 8090 (Abb. B)
Gut
Lachs
Salmonella enteritidis ATCC 13076
Gut
Farblos
Streptococcus faecalis ATCC 19433
Gehemmt
-
Nach: Alonso, J.L. et al., (1999) Comparison and recovery of Escherichia coli and thermotolerant coliforms in water with a
chromogenic medium incubated at 41 and 44.5 degrees C. Appl Environ Microbiol. 65:3746-9.
COLIFORME CHROMOGENER-AGAR 100 g CL45.2
525 g CL45.1
Escherichia coli
ATCC 25922
Escherichia coli
ATCC 25922 und
Citrobacter freundii
ATCC 8090
Produkt-Datenblatt
Page 2
COLIFORMS CHROMOGENIC AGAR
For selective enrichment and simultaneous detection of E. coli and other Coliforms in
water and food samples
CL45
Approximate formula in g/l:
Sodium chloride ..................................................................... 5.0
Phosphate puffer ................................................................... 4.9
Peptone ................................................................................. 3.0
Sodium pyruvate .................................................................... 1.0
Tryptophan ............................................................................ 1.0
Sorbitol ................................................................................... 1.0
Chromogenes ...................................................................... 0.36
Sodium heptadecylsulphate (Tergitol-7) ................................ 0.1
Agar ..................................................................................... 10.0
Final pH ................................................................... 6.8 ± 0.2
PREPARATION
Suspend 26.4 g of the medium in 1 l distilled water. Solubilise under heating with frequent agitation and boil for
approx. 1 min. Let slightly cool and pour into Petri dishes. Store in the dark at approx. 6 °C.
DO NOT AUTOCLAVE. DO NOT OVERHEAT. Can also be used for membrane-filter-technique.
USES
Coliforms Chromogenic Agar is used for identification and detection of coliform bacteria, especially E. coli, in food and water
samples. The interaction of ingredients in the medium, such as peptone, sorbitol, etc., grants a quick colony growth, including
infectious Coliforms.
Sodium heptadecyl sulphate (Tergitol 7) inhibits Gram-positive bacteria and the spreading of Proteus. The medium contains
tryptophan, therefore allowing tests of specific colonies for indole production, in order to verify E. coli as species according to
drinking water regulations.
Once incubation is completed, the colonies are analyzed for pigment formation. The chromogenic mixture contains chromogenic
substrates as Salmon-gal and X-glucuronide. Coliform enzymes produced, such as galactosidase and glucuronidase, cleave these
substrates, resulting in the different colouration of certain bacterial colonies (see below). The -D-galactosidase of coliforms in
general cleaves Salmon-gal substrate, giving a salmon to red colour to the coliform colonies. The -D-glucuronidase specific for E.
coli cleaves both substrates (Salmon-gal as well as X-glucuronide), resulting in a blue to dark violet colour of the E. coli colonies,
easily distinguishable from other coliform colonies. Due to the fact that this medium is not strictly selective, several other Gram
negative bacteria also grow (for instance salmonellas or pseudomonads), which can be identified due to the colourless appearance
of their colonies
Coliform bacteria are Gram-negative, bacillary bacteria which do not represent a taxonomic group, but are characterized for being
able to produce energy from lactose under acid and aerosis. They are prevalent particularly in the intestines of warm-blooded
animals. They can, however, survive for a time outside their natural environment and are therefore extremely suitable for analyzing
water samples for faecal contamination. However, some types of coliform bacteria do in fact live in the soil and in surface waters
with the result that the respective contamination of the water samples may be ascribed to other errors during treatment of water.
MICROBIOLOGICAL TEST
The following results were obtained from type cultures after incubation at a temperature of 35±2 °C and observed after 18-24
hours. Please note: E. coli strain O157:H7 is -glucuronidase negative and forms salmon-coloured colonies.
Microorganisms
Growth
Colony Colour
Escherichia coli ATCC 25922 (Fig. A and B)
Good
Blue - Violet
Escherichia coli ATCC 11775
Good
Blue - Violet
Citrobacter freundii ATCC 8090 (Fig. B)
Good
Salmon
Salmonella enteritidis ATCC 13076
Good
Colourless
Streptococcus faecalis ATCC 19433
Inhibited
-
Nach: Alonso, J.L. et al., (1999) Comparison and recovery of Escherichia coli and thermotolerant coliforms in water with a
chromogenic medium incubated at 41 and 44.5 degrees C. Appl Environ Microbiol. 65:3746-9.
COLIFORMS CHROMOGENIC AGAR
100 g CL45.2
525 g CL45.1
Escherichia coli
ATCC 25922
Escherichia coli
ATCC 25922 und
Citrobacter freundii
ATCC 8090
Carl Roth GmbH + Co. KG
Schoemperlenstraße 3-5 • 76185 Karlsruhe
P.O. Box 100121 • 76231 Karlsruhe
Phone: +49 (0) 721/ 5606-0
Fax: +49 (0) 721/ 5606-149
info@carlroth.com • www.carlroth.com sse 06/2021
The company is a limited partnership with headquarters in Karlsruhe, reg. court
Mannheim HRA 100055. Roth Chemie GmbH, with headquarters in Karlsruhe, reg.
court Mannheim HRB 100428, is the personally liable partner. Managing Director:
André Houdelet. Sales tax identification number: DE 143621073.
Product Data Sheet
Loading...