Roth 8333 User guide

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TCBS-AGAR

Zur selektiven Isolierung von Vibrio-Spezies gemäß ISO 21872
8333

Zusammensetzung in g/l:

Sucrose ......................................................................... 20

Natriumchlorid (NaCl) ................................................... 10

Natriumthiosulfat ........................................................... 10

Natriumcitrat ................................................................. 10

Pepton .......................................................................... 10

Hefeextrakt ..................................................................... 5

Galle (bovin) ................................................................... 8

Eisencitrat ....................................................................... 1

Thymolblau ................................................................ 0,04

Bromthymolblau ........................................................ 0,04

Agar .............................................................................. 14

pH-Wert........................................................... 8,6 ± 0,2

HERSTELLUNG

88 g des Mediums werden in einem Liter dest. Wasser suspendiert. Man mische 10 bis 15 Minuten lang.
Man erhitze unter häufigem Rühren/Schütteln und lasse eine Minute kochen um das Medium vollständig zu lösen.
Nicht überhitzen! Nicht Autoklavieren!
Man lasse auf 45 - 50 °C abkühlen, mische gut und gieße in Platten. Das fertige Medium ist grün und sollte bei
8 -15 °C aufbewahrt werden.

EINSATZGEBIET

TCBS - Agar ist ein häufig verwendetes selektives Medium zur Isolation und Kultivierung fast aller Bakterien des
Genus Vibrio wie V. cholerae und V. alginolyticus. Diese lösen Cholera, Cholera-artige Diarrhö und Lebensmittel­vergiftungen aus und kommen auf verunreinigten Lebensmitteln und in Stuhlproben vor. Die Symptome können
aber auch durch Vibrio parahaemolyticus ausgelöst werden, der auf rohem oder nur teilweise verarbeitetem
Fisch oder Meeresfrüchten vorkommt. Nur Vibrio hollisae wächst nicht auf TCBS-Agar.
Durch Natriumcitrat, Natriumthiosulfat und Rindergalle wird das Wachstum Gram-positiver Bakterien gehemmt.
Bei Kolonien, die aus dem Natriumthiosulfat Schwefelwasserstoff produzieren, reagiert dieses mit
Ammoniumeisen(III)-citrat und die betroffenen Kolonien färben sich schwarz, da schwarzes Eisensulfat gebildet
wird. Das Thymolblau und Bromthymolblau sind pH-Indikatoren.

Das zu untersuchende Material wird großzügig auf die Oberfläche der Platte geimpft und bei 35 ± 2 °C für
18 - 24 Stunden inkubiert. Sucrose-positive Vibrionen wie Vibrio cholerae und Vibrio alginolyticus sowie manche
Proteus-Spezies bilden Säure und wachsen daher gelb auf TCBS. Sucrose-negative wie Vibrio parahaemolyticus
und Vibrio vulnificus wachsen dagegen in blau-grünen Kolonien.

Produkt-Datenblatt

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MIKROBIOLOGISCHE TESTS

Die folgenden Ergebnisse wurden erzielt nach Inkubation von Referenzstämmen im angegebenen
Medium / Agar bei einer Temperatur von 37 ± 1 °C, ausgewertet nach 24 ± 3 Stunden.

Mikroorganismen

Inokulum (CFU)

Wachstum

Farbe der Kolonie

Vibrio parahaemolyticus NCTC 10885

103 - 104

Gut

Grün (Sucrose negativ)

Vibrio furnissi NCTC 11218

103 - 104

Gut

Gelb (Sucrose positiv)

Escherichia coli ATCC 25922

104 - 106

Null

-

Nach:

1.) Cholera Information (WHO) (1965)

2.) WHO Expert Committee on Cholera (2nd Rep. Techn., Rep. Series No. 352. (1967)

3.) Felsenfeld (1966) Bull. Wld. Hlth. Org. 34:161

4.) Kobayashi et al. (1963) Jap. J. Bacteriol. 18:387-291

TCBS-AGAR 500 g 8333.1

Carl Roth GmbH + Co. KG

Schoemperlenstraße 3-5 • 76185 Karlsruhe • Postfach 100121 • 76231 Karlsruhe
Telefon: [phone] • Fax: [phone] • [e-mail] • www.carlroth.de

Die Firma ist eine Kommanditgesellschaft mit Sitz in Karlsruhe, Reg. Gericht Mannheim HRA 100055. Persönlich haftende Gesellschafterin ist die Roth Chemie GmbH
mit Sitz in Karlsruhe, Reg. Gericht Mannheim HRB 100428. Geschäftsführer: André Houdelet sse 07/2021

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TCBS AGAR

For selective isolation of Vibrio species acc. to ISO 21872
8333

Formulation in g/l:

Sucrose ......................................................................... 20

Sodium chloride (NaCl) ................................................ 10

Sodium thiosulphate ..................................................... 10

Sodium citrate ............................................................... 10

Peptone ........................................................................ 10

Yeast extract ................................................................... 5

Bovine Bile ...................................................................... 8

Ferric citrate .................................................................... 1

Thymol blue ............................................................... 0.04

Bromothymol blue ..................................................... 0.04

Agar .............................................................................. 14

pH-value ......................................................... 8.6 ± 0.2

PREPARATION

Suspend 88 g of the medium in one litre of distilled or deionised water. Mix well for 10 to 15 minutes. Heat with
frequent stirring and boil for one minute to obtain an even uniform suspension. Do not overheat! Do not Autoclave!
Cool down to 45 - 50 °C, mix well and pour into plates. The prepared medium is green in colour and should be stored
at 8 - 15 °C.

USES

TCBS Agar is widely used for isolation and cultivation of almost all bacteria of the genus Vibrio like V. cholerae and
V. alginolyticus. These germs cause cholera, choleric diarrhoe and foodpoisoning. They are transferred through

contaminated food and fecal specimens. Vibrio parahaemolyticus can also induce these symptoms coming from
raw or partially processed fish or seafood. The only strain that does not grow on TCBS is Vibrio hollisae.
Sodium citrate, Sodium thiosulfate and ox bile inhibit the growth of Gram positive bacteria. Colonies producing H2S
from sodium thiosulphate appear in black color because the gas reacts with Ferric ammonium citrate producing
black iron sulfate. Thymolyblue and Bromthymol blue are pH indicators.
The sample is heavily inoculated on the surface of the plate and incubated for 18 - 24 hours at 35 ± 2 °C. Sucrose
positive strains like Vibrio cholerae and Vibrio alginolyticus as well as some Proteus species produce acid and,
therefore, grow in yellow colonies on TCBS. Sucrose negative strains like Vibrio parahaemolyticus and Vibrio
vulnificus grow in greenish-blue colonies.

Product Data Sheet

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MICROBIOLOGICAL TEST

The following results were obtained in the performance of the medium from type cultures after incubation at a
temperature of 37 ± 1 °C and observed after 24 ± 3 hours.

Microorganisms

Inoculum (CFU)

Growth

Colony Color

Vibrio parahaemolyticus NCTC 10885

103 - 104

Good

Green (sucrose negative)

Vibrio furnissi NCTC 11218

103 - 104

Good

Yellow (sucrose positive)

Escherichia coli ATCC 25922

104 - 106

Total inhibition

-

Acc. to:

1.) Cholera Information (WHO) (1965)

2.) WHO Expert Committee on Cholera (2nd Rep. Techn., Rep. Series No. 352. (1967)

3.) Felsenfeld (1966) Bull. Wld. Hlth. Org. 34:161

4.) Kobayashi et al. (1963) Jap. J. Bacteriol. 18:387-291

TCBS AGAR 500 g 8333.1

Carl Roth GmbH + Co. KG

Schoemperlenstraße 3-5 • 76185 Karlsruhe • P.O. Box 100121 • 76231 Karlsruhe
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