Roth 5771 User guide

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SCHAEDLER-AGAR
Zur Wiederbelebung und Kultivierung von Anaerobiern 5771
Zusammensetzung in g/l (angenähert):
Caseinpepton ..................................................................... 5,66
Sojapepton ............................................................................ 1,0
Natriumchlorid ..................................................................... 1,66
Kaliumhydrogenphosphat ................................................... 0,83
Peptonmischung ................................................................... 5,0
Hefeextrakt .......................................................................... 5,0
Glucose .............................................................................. 5,83
Tris ....................................................................................... 3,0
L-Cystin ................................................................................ 0,4
Hemin ................................................................................ 0,01
Agar ................................................................................... 13,5
pH-Wert .................................................................... 7,6 ± 0,2
HERSTELLUNG
41,9 g des Mediums werden in einem Liter destillierten Wasser suspendiert. Man mische gut und erhitze langsam bis das Medium vollständig gelöst ist. Man kühle auf 45-50 °C ab und gebe, wenn gewünscht, unter sterilen Bedingungen 5 % defibr. Blut zu. Gut mischen und in Petrischalen gießen. Bei der Zugabe von Blut Luftblasen vermeiden. Das Medium ist leicht trübe und beige oder rot (nach Blutzugabe).
EINSATZGEBIET
Schaedler-Agar entspricht der Formulierung nach Schaedler und Mitarbeitern1, nach Modifikation durch Mata et al.2. Durch den hervorragenden Nährwert und das niedrige Redoxpotential ist das Medium sehr gut geeignet zur Unterstützung der Proliferation anspruchsvoller Anaerobier aus dem Gastrointestinaltrakt und anderen inneren Organen. Unter Standardbedingungen wird das Wachstum von Anaerobiern reduziert durch die starke Proliferation von Enterococcus, Escherichia coli, Enterobacter und anderen fakultativ anaeroben Darmbakterien. In Schaedlermedien werden Cystin und Glucose eingesetzt, um das Redoxpotential zu erniedrigen und hierdurch speziell das Wachstum anaerober Organismen zu unterstützen, da bei dem sonst oft verwendete Thioglycollat ein inhibitorischer Effekt auf manche Anaerobier festgestellt wurde. Wir empfehlen, Methoden zur Kultivierung von anaeroben Mikroorganismen in der Lebensmittelanalyse anzuwenden. Eine definierte Menge der Probe wird in einem bekannten Volumen einer Salzlösung suspendiert. Ein ml hiervon wird verwendet, um serielle Verdünnungen anzulegen. Mit einer kalibrierten Impföse werden (vorher getrocknete) Doppelplatten inokuliert. Diese werden bei der für die jeweilige Analyse vorgeschriebenen Temperatur und Zeit inkubiert. Zur Zählung sollten Platten herangezogen werden, die 30 bis 100 Kolonien enthalten. Schaedler-Agar kann weiterhin für die Isolation und Wiederherstellung von anaeroben Bakterien aus Fäkalien und Darminhalt verwendet werden, indem selektive Reagenzien zugesetzt werden (wie in den Klammern aufgeführt): Lactobacillus und Streptococcus (NaCl 10 g/l, Neomycin 2 mg/l, Best. Nr. 8668), Clostridium und Bacteroides (Plazentapulver 2 g/l, Neomycin 2 mg/l), Flavobacterium (7 ml/l Tyrothricin 0,5 % in Ethanol). Es wird anaerob bei 35 °C inkubiert. Bitte beachten: Wird Schaedler-Agar ohne Zusatz von Blut eingesetzt, müssen zum Nachweis von obligate anaeroben Bakterien strikt anaerobe Bedingungen eingehalten werden.
MIKROBIOLOGISCHE TESTS
Die folgenden Ergebnisse wurden erzielt nach Inkubation von Referenzstämmen im angegebenen Medium unter anaeroben Bedingungen bei einer Temperatur von 35±2 °C für 24-48 Stunden.
Mikroorganismen
Wachstum
Bacteroides fragilis ATCC 25285
Gut
Clostridium butyricum ATCC 9690
Gut
Clostridium perfringens ATCC 13124
Gut
Streptococcus pyogenes ATCC 19615
Gut
1
Schaedler, R.W. et al. (1965) The Development of the Bacterial Flora in the Gastrointestinal Tract of Mice. J. Exp. Med. 122:59-66.
2
Mata L.J. Carrillo and Villatoro E. (1966) Fecal Microflora in a Preindustrial Region. Appl. Microbiol, 17:396:602.
SCHAEDLER AGAR 500 g 5771.1
Produkt-Datenblatt
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SCHAEDLER AGAR
For recovery and cultivation of anaerobic microorganisms 5771
Schaedler Agar is based on CASO Broth / Trypticasein Soy Broth (X938).
Approximate formula in g/l:
Casein peptone .................................................................. 5,66
Soy peptone .......................................................................... 1,0
Sodium chloride .................................................................. 1,66
Dipotassium hydrogen phosphate ...................................... 0,83
Peptone mixture .................................................................... 5,0
Yeast extract ........................................................................ 5,0
Glucose .............................................................................. 5,83
Tris ....................................................................................... 3,0
L-Cystine .............................................................................. 0,4
Hemin ................................................................................ 0,01
Agar ................................................................................... 13.5
pH value ................................................................... 7,6 ± 0,2
PREPARATION
Suspend 41.9 g of the medium in one liter of distilled or deionised water. Mix well. Heat slowly until the medium is dissolved. Cool to 45 - 50°C and, if desired, add 5 % sterile defibrinated blood. Homogenize gently and pour into Petri dishes. Be careful to avoid bubble formation when adding the blood. The medium is slightly opalescent and beige or red (with supplemented blood).
USES
Schaedler Agar is prepared according to the formulation described by Schaedler and coworkers1, as modified by Mata et al.2. Due to its superior nutritive properties and its low oxidation-reduction potential the medium can easily support the
growth of fastidious anaerobes from the intestinal and digestive tracts and other internal organs. Under standard conditions, proliferation of anaerobes is diminished by the rapid increase of Enterococcus, Escherichia coli, Enterobacter, and other intestinal facultative anaerobic bacteria. In Schaedler media, cystine plus dextrose is used to lower the oxidation-reduction potential and specifically support growth of anaerobic organisms, since the widely used thioglycollate has shown inhibitory potential to some anaerobic microorganisms. We recommend consulting methods for the cultivation of anaerobic organisms in food analysis. Suspend a determined amount of the sample in a known volume of physiological saline. Take 1 ml for preparation of serial dilutions. With a calibrated loop inoculate duplicate plates, previously dried, and incubate for the appropriate time and temperature valid for the type of culture under test. For enumeration, select those plates that contain 30 to 100 colonies. Schaedler Agar can also be used for the isolation and recovery of anaerobic bacteria from faeces and contents of the intestinal tract by adding selective substances as given in brackets: Lactobacillus and Streptococcus (NaCl 10 g/l, Neomycin 2 mg/l, Art. No. 8668), Clostridium and Bacteroides (placenta powder 2 g/l, Neomycin 2 mg/l), Flavobacterium (7 ml/l tyrothricin 0.5 % in ethanol). Incubate anaerobically at 35 °C. Note: When using Schaedler Agar without blood, strict anaerobic conditions have to be implemented for detection of obligate anaerobes.
MICROBIOLOGICAL TEST
The following results were obtained in the performance of the given medium from type cultures after incubation under anaerobic conditions at a temperature of 35±2 °C and observed after 24-48 hours.
Microorganisms
Growth
Bacteroides fragilis ATCC 25285
Good
Clostridium butyricum ATCC 9690
Good
Clostridium perfringens ATCC 13124
Good
Streptococcus pyogenes ATCC 19615
Good
1
Schaedler, R.W. et al. (1965) The Development of the Bacterial Flora in the Gastrointestinal Tract of Mice. J. Exp. Med. 122:59-66.
2
Mata L.J. Carrillo and Villatoro E. (1966) Fecal Microflora in a Preindustrial Region. Appl. Microbiol, 17:396:602.
SCHAEDLER AGAR 500 g 5771.1
Product Data Sheet
Carl Roth GmbH + Co. KG
Schoemperlenstraße 3-5 • 76185 Karlsruhe • P.O. Box 100121 • 76231 Karlsruhe Phone: +49 (0) 721/ 5606-0 • Fax: +49 (0) 721/ 5606-149 • info@carlroth.com www.carlroth.com
The company is a limited partnership with headquarters in Karlsruhe, reg. court Mannheim HRA 100055. Roth Chemie GmbH, with h eadquarters in Karlsruhe, reg. court Mannheim HRB 100428, is the personally liable partner. Managing Director: André Houdelet. Sales tax identification number: DE 143621073. sse 07/2021
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