Roth 4817 User guide

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Gebrauchsanweisung
CompactDry SL
4817
NISSUI ready-to-use, steril Fertigplatten mit getrocknetem chromogenem Nährmedium zum Nachweis von Salmonellen
A. Einleitung
Die Compact Dry Platten von NISSUI sind geeignet zum Nachweis und zur Zählung von Mikroorganismen aus Lebens- und Futtermitteln, Kosmetika und pharmazeutischen Proben, sowie zur Hygieneüberwachung und Kontaminationskontrolle im lebensmittelproduzierenden Bereich. Durch die chromogenen Zusätze zeigen sich die Bakterienkolonien in spezifischen Farben und sind einfach auszuwerten. Das Medium der Compact Dry SL Platten ist abgeleitet vom Tripel-Zucker-Eisen-Agar. Salmonellen sind eindeutig zu identifizieren durch die Darstellung als grüne Kolonien, verbunden mit einer Gelbfärbung der Platte durch Alkalisierung des Mediums. Schwefelwasserstoff-bildende Salmonellen wachsen in schwarzen Kolonien auf gelbem Medium.
B. Lagerung und Verwendbarkeit
CompactDry Platten sind stabil bei Raumtemperatur und bei 4 °C. Trocken und lichtgeschützt lagern. Bitte benutzen sie das Produkt nicht nach Ablauf der aufgedruckten Haltbarkeit, da die Qualität dann nicht mehr gewährleistet werden kann. Verwenden Sie das Produkt nicht, falls es nicht ordnungsgemäß verschlossen war, die Platten Flecken oder Färbungen aufweist oder fremde Materialien enthält. Nachdem der Öffnen der Blister können einzelne Platten entnommen werden. Nicht benötigte Platten im Blister lassen und diesen sorgfältig verschließen. Platten aus geöffneten Blistern schnellstmöglich verbrauchen.
C. Probenvorbereitung
Aus Wasser oder flüssigen Lebensmitteln
1 Volumen flüssige Probe wird mit 9 Volumenteilen Peptonwasser, gepuffert, versetzt. Anschließend wird diese Mischung durch einen Membranfilter filtriert und der Filter wird in Peptonwasser, gepuffert, überführt.
Aus festen Lebensmitteln
Überführen Sie 25 g des zu untersuchenden Lebensmittel in einen sterilen Homogenisierungsbeutel. Nach Zugabe von 225 ml Peptonwasser, gepuffert, wird die Mischung circa 1 min. homogenisiert.
Von Oberflächen
Wir empfehlen die Verwendung des CompactDry Tupfers (Best.-Nr 225K). Mit dem sterilen, feuchten Wattetupfer kann die Oberfläche gewischt werden. Der Tupfer wird zurück in die Aufnahmeflüssigkeit überführt. Nach Schütteln wird die gesamte Lösung (1 ml) zu 9 ml Peptonwasser, gepuffert, gegeben.
D. Anwendung
1. Die Proben im geschlossenen Homogenisierungs­beutel für 20-24 Stunden bei 35-37°C im Inkubator anreichern
2. Die Probe im geschlossenen Beutel manuell mischen.
3. Die Platte öffnen und 0,1ml (3 Tropfen) dieser Vorkultur vorsichtig ca. 1 cm vom Rand der Platte entfernt auf die Compact Dry SL aufgetragen. Die Probe soll am Auftragungsort von der Platte aufgesaugt werden und soll nicht den Plattenrand erreichen.
4. 1 mL steriles Wasser vorsichtig auf der gegenüberliegenden Seite des Probenauftragspunktes auf die Platte tropfen. Das Wasser diffundiert automatisch und gleichmäßig in die Nährsubstanz und rehydriert das Gewebe innerhalb von Sekunden zu einem Gel.
5. Platte mit Deckel verschließen und auf matter Fläche beschriften.
6. Geschlossene Platte umdrehen und bei vorgegebener Temperatur inkubieren.
7. Nach Inkubation die Anzahl der farbigen Kolonien von der Rückseite der Platte her zählen. Ein weißes Papier als Unterlage erleichtert den Zählvorgang. Inkubation: Bitte verwenden Sie die von nationalen Reglementierungen empfohlenen Inkubations-
temperaturen zur Analyse von Gesamtlebend­keimzahlen in Lebensmitteln. Allgemeine Empfehlung: 42 °C für 24 h
E. Interpretation
Salmonellen-Positiv
1.) Es treten einzelne oder verschmierte schwarze oder grüne Kolonien auf.
2.) Das Medium um diese Kolonien hat eine gelbe Färbung angenommen.
3.) Die Kolonien sind vom Austragungsort der Probenvorkultur über die Platte gewandert (Motilität) Beim Vorhandensein aller drei Merkmale (Farbumschlag nach gelb, grün-schwarze Kolonienbildung und Motalität) ist von einer Salmonellen-Kontamination auszugehen.
Bei einem Probenauftrag mit einer sehr hohen Anzahl von Salmonellen werden keine unterscheidbaren Einzelkolonien gebildet. Die gesamte CompactDry SL Platte zeigt einen Farbumschlag nach gelb mit fusionierten schwarzen/grünen Kolonien.
Mögliche Samonella-positive oder –negative Kolonien müssen durch mikrobiologische Nachweise bestätigt werden.
Salmonellen-Negativ
Die Platte zeigt keinen Farbumschlag oder einen Farbumschlag nach rot oder rot/lila (Fermentation der Laktose und/oder der Sukrose durch Coliforme). Keine grünen oder scharzen Kolonien sind sichtbar. Bitte beachten: Sehr hohe Kolonienzahlen verschiedener Proteus- und Pseudomonas-Stämme können ebenfalls zu einem limitierten gelben Farbumschlag führen. Hierbei sind aber weder schwarze oder grüne Kolonien, noch ein Wandern der Bakterien über die Platte sichtbar. Andere Gram-negative Bakterien sind im Wachstum inhibiert bzw. zeigen keinen Farbumschlag.
F. Allgemeine Bemerkungen
Nicht alle Kolonien zeigen immer eine eindeutige Färbung. Schwach gefärbte Kolonien sollten sicherheitshalber als positiv gewertet werden.
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Bitte verschließen Sie die Compact Dry Platten gut, um ein Austrocknen während der Inkubation zu verhindern
Nach Gebrauch entsprechend der gültigen Abfallregelung die Platten entsorgen.
Die Plattenfläche beträgt 20 cm2. Auf der Plattenrückseite ist ein Raster mit 1 x 1 cm eingraviert, um die Koloniezählung zu erleichtern. Sollte es problematisch sein auf Grund hoher Koloniedichte eine ganze Platte auszuzählen, sind einzelne Quadrate auszuzählen und der Mittelwert mit 20 zu multiplizieren.
Compact Dry Platten können bis zu 300 Kolonien pro Platte nachweisen. In solchen Fällen sollten geeignete Verdünnungen ausplattiert werden.
Compact Dry Platten werden in einem ISO 9001 zertifizierten Betrieb gefertigt.
CompactDry SL 4817.1 40 Platten
4817.2 240 Platten
Carl Roth GmbH + Co. KG
Schoemperlenstraße 3-5 • 76185 Karlsruhe Postfach 100121 • 76231 Karlsruhe
Telefon: +49 (0) 721/ 5606-0 Fax: +49 (0) 721/ 5606-149 info@carlroth.de www.carlroth.de sse 07/2021
Die Firma ist eine Kommanditgesellschaft mit Sitz in Karlsruhe, Reg. Gericht Mannheim HRA 100055. Persönlich haftende Gesellschafterin ist die Roth Chemie GmbH mit Sitz in Karlsruhe, Reg. Gericht Mannheim HRB 100428. Geschäftsführer: André Houdelet
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CompactDry SL
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NISSUI ready-to-use, sterile Ready-made plates with anhydrous chromogenic nutrient medium for detection of samonellae
A. Introduction
Compact Dry plates made by NISSUI are suitable for detection and enumeration of microorganisms from foods and feeds, cosmetics and pharmaceutical samples, as well as for hygiene monitoring and contamination control in food-producing areas. Due to the chromogenic additives, bacterial colonies depict specific colouring, making them easy to interpret. The nutrient medium used for Compact Dry SL plates is deduced from the formulation of Triple Sugar Iron Agar. Salmonellae may easily be identified by the green colouring of the colonies, accompanied by colour shift of the plate to yellow due to alcalization of the medium. Salmonellae producing hydrogen sulphide grow in black colonies on yellow medium.
B. Storage and Usage
CompactDry plates are stabile at room temperature and at 4 °C. Store protected from moisture and light. Do not use the product after its expiry date. Quality of the product is not warranted after being expired. Do not use the product that contains any foreign materials, discoloured or dehydrated, or its container is damaged. After opening the aluminum bag, any plates unused should be put back into the aluminum bag to be sealed with tape to avoid light and moisture, and use up as soon as possible.
C. Sample preparation
From waters or liquid foods
Add 9 times volume of Buffered Peptone Water to 1 vol. liquid specimen. Filtrate the liquid sample through membrane filter, and put the filter into Buffered Peptone Water.
From solid foods
Take 25 g of solid specimen into the sterilized homogenizer bag. Add 225 ml of sterile Buffered Peptone Water into the bag, and homogenize for about one (1) minute
From surfaces
Wir recommend using the CompactDry Swab (Art. No. 225K). Use the swab to wipe the surface, put into the device with wiping solution. Add 9 ml of Buffered Peptone Water to 1 ml of this solution.
D. Application
1. Incubate the samples in the closed homogenizer bag for 20-24 hours at 35-37 °C in the incubator for preenrichment.
2. Rub the bag for homogenization.
3. Open the plate and gently drop 0.1 ml (3 drops) of enriched specimen onto the dry sheet (approx. 1 cm far from the edge of plate). This enriched culture will stay at dropped point. Diffusion of this dropped specimen shall not reach to the edge of plate.
4. Gently drop 1 ml of sterilized water at the opposite point where the specimen dropped. The water diffuses automatically and evenly into the sheet and transforms the dried sheet into a gel within seconds.
5. Put the cap back onto the plate and note date and sample on the memorandum section.
6. Turn over the capped plate and incubate at appropriate temperature.
7. After incubation count the number of coloured colonies underneath the plate. White paper placed under the plate helps with counting. Incubation: Please use the incubation time/temperature according to the national food analysis recommended for total viable count. General recommendation: 42 °C for 24 hours
E. Interpretation
Salmonella Positive
1.) Black to green isolated or fused colonies.
2.) Colour of sheet around the colonies is changed to yellow.
3.) Colonies have wandered all over the plate (motility). In case of all three parameters are positive, consider sample as Salmonella contaminated. If a large quantity of Salmonella is present, no isolated colonies are formed Rather there may be several spots with fused black or green colonies, and whole plate sheet becomes yellow.
Putative Salmonella positive or negative colonies have to be confirmed by microbiological identification and confirmation tests.
Salmonella Negative
There is no colour with the medium. If it occurs, the sheet colour would change to red or reddish purple due to fermentation of lactose or sucrose by coliforms. No black or green colonies are observed. Please note: The sheet colour might change to yellow caused by large colony numbers of Pseudomonas or Proteus. But yellow portion is small and limited because of their less motility. Other Gram-negative bacteria are inhibited in growth or don’t show any colour shift.
F. General comments
Some colonies may be only weakly coloured. Since false-negative results have to be avoided, those colonies have to be counted as positives.
Make sure CompactDry plates are well closed during incubation, in order to avoid drying.
High concentrations on plates will cause the entire growth area to become red/pink. In this case dilute the sample.
After use please follow the current disposal regulations.
The growth area is 20 cm². The back of the plate has a grid carved of 1 x 1 cm to make the colony counting easier. In case of any difficulties to count colonies due to large number of colonies grown, total viable count can be obtained by multiplying 20 by an average number of colonies per grid counted from several grids.
Instructions for use
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Compact Dry plates may grow up to 300 colonies per plate. In those cases we recommend appropriate dilution of the samples.
Compact Dry plates are produced at an ISO 9001 certified site.
CompactDry SL 4817.1 40 plates
4817.2 240 plates
Carl Roth GmbH + Co. KG
Schoemperlenstraße 3-5 • 76185 Karlsruhe P.O. Box 100121 • 76231 Karlsruhe Phone: +49 (0) 721/ 5606-0 Fax: +49 (0) 721/ 5606-149 info@carlroth.com www.carlroth.com sse 07/2021
The company is a limited partnership with headquarters in Karlsruhe, reg. court Mannheim HRA 100055. Roth Chemie GmbH, with headquarters in Karlsruhe, reg.
court Mannheim HRB 100428, is the personally liable partner. Managing Director:
André Houdelet. Sales tax identification number: DE 143621073.
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