Agilent SampliQ User Manual
Améliorez la qualité de votre
préparation d'échantillons
Améliorez la qualité
de vos analyses
La gamme Agilent SampliQ
pour la préparation
d'échantillons
2
Sommaire
Introduction aux cartouches SampliQ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3
Sélection de votre produit . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4
Phases SampliQ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
Présentation des qualités des cartouches SampliQ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6
Polymère . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7
Utilisation des polymères SampliQ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8
OPT . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .10
SCX . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .12
SAX . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .14
DVB . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .16
PS-DVB . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .17
Silice . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .18
C18EC . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .18
C18 ODS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .19
C8 octyle . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .20
C2 éthyle . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .21
Phényle . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .21
Silice 22 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .22
Cyano (CN) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .23
Diol . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .23
Amino . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .24
Si-SCX . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .25
Si-SAX . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .26
Autres phases . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .27
Florisil PR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .27
Alumina A . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .28
Alumina B . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .29
Alumina N . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .29
Carbone . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .30
C8/Si-SCX . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .31
Modules d'extraction et accessoires . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .32
Evidex . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .32
Phases en vrac . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .33
Cartouches vides et frittés . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .34
QuEChERS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .35
Modules d'extraction et accessoires . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .36
Modules d'extraction sous vide . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .36
Adaptateurs et pièces de rechange . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37
Modules d’extraction sous vide pour plaques à 96 puits . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .38
3
Qu'est-ce que la SPE ?
Fabriqués aux États-Unis selon la norme ISO-9001 la plus stricte – le même
processus de fabrication qu'Agilent utilise pour les phases des colonnes de
CLHP – les produits de SPE Agilent SampliQ sont de très haute qualité et
leurs performances sont dignes de ce que vous attendez du chef de file des
fabricants d'instrumentation analytique, de colonnes et de fournitures. Les
produits SPE SampliQ, vous apportent :
• Un large choix de phases polymère, silice et autres dans des formats de
tailles multiples des cartouches aux plaques à 96 puits.
• Un greffage trifonctionnel de la silice qui procure une stabilité plus grande
que le greffage monomérique tout en élargissant la gamme des solvants
compatibles.
• Un contrôle qualité à la pointe de l'industrie ce qui vous assure une
granulométrie constante garante des caractéristiques de débit et de
performances.
• Une gamme complète de modules d'extraction sous vide et d'accessoires
pour répondre à tous vos besoins en SPE.
Pour passer commande, rendez-vous sur le site
www.agilent.com/chem/SampliQ.
L'extraction en phase solide
(SPE) est une technique rapide
de purification des extraits,
d'un bon rapport coût / efficacité,
qui améliore la précision et la
reproductibilité des résultats.
Avec la SPE vous pouvez obtenir
une mesure définitive au lieu de
résultats inexacts, imprécis et
non reproductibles.
La préparation d'échantillon
est une partie essentielle d'une
mesure chromatographique
réussie parce qu'elle diminue
le nombre et la quantité
d'interférences potentielles qui
peuvent être néfastes pour la
séparation, la détection et la
quantification. La préparation
des échantillons peut également
augmenter la durée de vie d'une
colonne.
En d'autres termes, la SPE
réduit la complexité de
l'échantillon. Basée sur les
principes de la CLHP, la SPE
élimine sélectivement les
interférences et/ou les analytes
de matrices complexes par
exemple des aliments, des
échantillons environnementaux
et des spécimens biologiques.
La SPE peut également
remplacer des protocoles
d'extraction liquide-liquide,
ce qui améliore le débit de
préparation d'échantillon et
diminue la consommation de
solvant.
Extraction et concentration fiables d'échantillons dans
des matrices complexes et résultats exacts et
reproductibles depuis le début.
4
Ionique Non-ionique
(paire d'ions)
Hydrosoluble
Soluble dans un solvant organique
Soluble dans des
solvants polaires :
MeOH (méthanol),
ACN (acétonitrile), THF
(tétrahydrofurane)
Soluble dans des
solvants modérément
polaires : Et OAc
(acétate d'éthyle),
CH
2Cl2
(chlorure de
méthylène), Et
2
O
(diéthyléther)
Soluble dans des
solvants apolaires :
C5 (n-pentane),
C6 (n-hexane) et
iC8 (iso-octane)
Échantillon organique
Poids mol. < 2000
Anionique
Polaire Modérément polaire Apolaire
Polaire Modérément polaire Apolaire
Cationique
CEX
Échange
de cations
AEX
Échange
d'anions
n-BPC
Chromatographie
sur phase greffée
normale
LSC
Chromatographie
liquide-solide
RPC
Chromatographie
en phase inverse
n-BPC
Chromatographie sur
phase greffée normale
LSC
Chromatographie
liquide-solide
RPC
Chromatographie
en phase inverse
Ce diagramme vous aidera à choisir votre produit SampliQ : cartouche polymère, silice, ou autre phase pour les applications de
routine nécessitant des résultats constants avec des volumes d'échantillon plus élevés et des limites de détection plus basses.
Solubilité
Caractère
moléculaire
Phases
stationnaires
Modes
Phases :
polymères
Phases :
à base de silice
Phases :
non silice
Phases :
Spécialité
SCX
Échange
de cations
forts
SAX
Échange
d'anions
forts
OPT, DVB,
PS-DVB
OPT, DVB,
PS-DVB
Si-SCX,
C8/Si-SCX
(mode
mixte)
Si-SAX,
Amino
(WAX)
Cyano, diol,
amino
Silice
C18, C18EC, C8,
C2, phényle
Cyano, diol, amino
Silice
C18, C18EC, C8, C2,
phényle
Florisil PR,
alumine A,
alumine B,
alumine N,
carbone
Florisil PR, alumine A,
alumine B, alumine N,
carbone
EVIDEX pour les tests toxicologiques
Sélection de produits SPE et de phases Agilent SampliQ
Passez plus vite à la méthode appropriée
pour votre analyse
5
Différentes formules et différents procédés de fabrication permettent de créer des phases qui entraînent des différences de
sélectivité, de sorte qu'il n'y a pas d'équivalent universel pour chaque application. Cependant, les performances des produits
peuvent être similaires dans de nombreuses applications. Ce tableau présente des suggestions pour utiliser les produits
SampliQ Agilent comparés à des produits d'autres fabricants.
Si vous utilisez...
Essayez ce produit SampliQ
Agilent...
Polymères
Bond-Elut Plexa, Oasis HLB, Strata-X
SampliQ OPT
Bond-Elut ENV, Strata SDB-L, Supelclean ENVI-Chrom P
SampliQ PS-DVB
Bond-Elut Plexa PCX, Oasis MCX, Strata X-C
SampliQ SCX
Oasis MAX
SampliQ SAX
Silice et autres phases
Phase inverse
Bond-Elut C18, Discovery DSC-C18, Sep-Pak tC18, Strata C18-E, Supelclean ENVI-18,
Supelclean LC-18
SampliQ C18EC
Bond-Elut C18OH, Sep-Pak C18, Strata C18-U
SampliQ C18
Bond-Elut C8, Sep-Pak C8, Strata C8
SampliQ C8
Bond-Elut C2, Sep-Pak tC2
SampliQ C2
Discovery DSC-Ph, Strata Phenyl (PH), Supelclean LC-Ph
SampliQ phényle
Mode mixte
Bond-Elut Certify-I, Strata Screen-C
SampliQ Evidex
Phase normale (polaire)
Bond-Elut SI, Discovery DSC-Si, Sep-Pak Silica, Strata Si-1, Bond-Elut SI, Discovery DSC-Si,
Sep-Pak Silica, Strata Si-1
SampliQ silice
Bond-Elut FL, Sep-Pak Florisil, Strata FL-PR, Supelclean LC Florisil, Supelclean ENVI Florisil
SampliQ Florisil PR
Bond-Elut NH2, Discovery DSC-NH2, Sep-Pak Amino Propyl, Strata NH2, Supelclean LCNH2
SampliQ amino
Bond-Elut 2OH, Discovery DSC-Diol, Supelclean LC-Diol
SampliQ diol
Bond-Elut CN-U, Discovery DSC-CN, Sep-Pak Cyano Propyl, Strata CN, Supelclean LC-CN
SampliQ Cyano
Bond-Elut AL-A,B,N, Sep-Pak Alumina A, B, N, Supelclean LC-Alumina A,B,N
SampliQ alumine A, B, N
Échange d'ions
Bond-Elut SAX, Discovery DSC-SAX, LC-SAX, Sep-Pak AccellPlus QMA, Strata SAX
SampliQ Si-SAX
Bond-Elut SCX, Discovery DSC-SCX, Sep-Pak AccellPlus SCX, Strata SCX, Supelclean LC-SCX
SampliQ Si-SCX
Autres
Supelclean ENVI-Carb
SampliQ carbone
Correspondance de phases comparables par fabricant
6
Le certificat de performances Agilent SampliQ fourni avec chaque boîte vous apporte
l'assurance de travailler avec une phase, une résine, une cartouche ou une plaque à
puits de caractéristiques constantes. Les produits SampliQ sont soumis aux contrôles
de qualité suivants :
• Tests de débit assurant la reproductibilité de la récupération
• Tests de propreté utilisant des instruments de CLHP, de CPL/SM, et de CPG
pour les phases et résines, les tubes, les frittés et les produits finaux – afin
qu'aucun contaminant ne vienne interférer le long du parcours de votre
échantillon
• Tests des caractéristiques de surface visant à assurer la constance de la
rétention : mesure de la reproductibilité de la surface spécifique, du diamètre
moyen ainsi que du volume total des pores.
• Contrôle du poids garantissant l'homogénéité d'une cartouche à l'autre et
d'une plaque à puits à l'autre
• Tests de turbidité des extraits garantissant la limpidité de vos extraits
• Analyse / mesure en continu des paramètres suivants : temps de rétention
et sélectivité relative pour divers composés (assurant des performances
constantes), charge en carbone des matériaux silice (afin de déterminer la
couverture de surface) et caractéristiques de l'échange d'ions (pour assurer
des performances constantes)
Nos sévères spécifications permettent d'obtenir une meilleure reproductibilité d'un
lot à l'autre, des caractéristiques de débit excellentes et des produits plus propres
avec les limites d'extraction les plus basses.
Vos cartouches seront expédiées dans des conteneurs à plusieurs couches scellés
sous vide et testés par CPG pour vérifier l'absence d'adsorption de contaminants –
elles arrivent ainsi chez vous aussi vierges qu'elles l'étaient au moment de leur
remplissage.
Notre passion pour l'excellence...
7
Les phases polymères utilisées pour toutes les cartouches SampliQ SPE
Agilent réduisent significativement les interférences de la matrice et améliorent
ainsi la sensibilité et la qualité des résultats analytiques. Les phases et cartouches
polymère SampliQ Agilent présentent également les avantages suivants :
• Rétention élevée, récupération exceptionnelle et et excellente reproductibilité.
• Robustesse élevée des phases : si des cartouches sèchent accidentellement
durant le processus SPE, vous ne risquez pas de perdre des composés et/ou
d'altérer la reproductibilité.
• Pas de fuites des phases greffées ou autres lixiviats qui pourraient contaminer
vos extraits précieux.
• Compatibilité avec la plupart des solvants organiques et solutions aqueuses
dans un intervalle de pH de 0 à 14.
• Particules sphériques et granulométrie étroite assurant des caractéristiques
de circulation reproductibles.
• Limites de détection améliorées et volumes de résine réduits.
• Contrairement aux phases à base de silice, il n'y a pas de groupes silanol
qui peuvent affecter la récupération des composés basiques.
Technologie des SampliQ polymère Agilent
Simplifie votre développement de méthode SPE
et améliore vos résultats.
8
Log P < 1,5
Anions/hydrophiles
pKa < 3
Log P > 1,3
Hydrophobes
pKa > 3
Soluble dans le méthanol
Log P < 1,5
Hydrophile/cation
pKa > 10
Hydrosoluble
Hydrosoluble
Acide formique à 2 %
dans l'eau
Échantillon préparé dans une solution saline
tamponnée aux phosphates (pH 7) avec ajout
d'étalon interne
Échantillon préparé avec ajout d'étalon interne dans l'eau
Acide formique à 0,1%
dans le méthanol
Méthanol
Acétate de sodium (pH 7) 50 mM dans 5 %
de méthanol
2 % d'acide formique dans l'eau
Méthanol ou acide formique
à 0,1 % dans le méthanol
NH
4
OH à 3% dans le méthanol
5 à 10 % de méthanol dans l’eau
La fraction de méthanol peut être collectée si
des composés neutres doivent être récupérés
neutre
Acide formique à 2 % dans le méthanol
POLYMÈRE
Eau
Ce diagramme représente une méthode pour débuter et peut devoir être modifié en fonction de vos analytes spécifiques.
CONDITIONS
ÉQUILIBRAGE
CHARGE
LAVAGE
ÉLUANT
SÉCHER ET REPRENDRE DANS LA PHASE MOBILE
ÉLIMINATION DES
INTERFÉRENCES
pKa < 10
Méthode A/N/B sur SampliQ polymère Agilent
Acide
Neutre
Basique
SampliQ SAX
SampliQ OPT
SampliQ SCX
Le débit recommandé à travers la cartouche est de 1 ml par minute maximum
Séchage : < 1 minute Séchage : 2 minutes
Séchage : 2 minutes
Séchage : < 1 minute
Séchage : < 1 minute Séchage : < 1 minute
ÉLIMINATION DES
INTERFÉRENCES
La fraction de méthanol peut être collectée si
des composés neutres doivent être récupérés
9
Si les propriétés chimiques de vos composés cibles couvrent la gamme des
acides, des neutres et des bases, un mécanisme de rétention en mode mixte
vous permettra de développer une méthode faisant appel à une seule phase
(cf. le diagramme de la page 8).
Les phases SampliQ polymère présentent différents comportements en mode
mixte. A titre d'exemple, la phase SampliQ SCX présente une rétention en phase
inverse et par échange de cations de sorte que les composés basiques et neutres
soient sélectivement retenus. Les phases SampliQ OPT, SAX, et SCX retiennent
une vaste gamme d'analytes acides (A), neutres (N) et basique (B), de sorte que
vous êtes certains de trouver une cartouche qui répond à votre besoin.
Volume type par taille*
Conditions Équilibrage Charge Lavage Éluant
1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml
3ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml
6 ml 3ml 3ml 5ml 4 ml 4 ml
Plaque à
96 puits
200 µl 200 µl 200-500 µl 200 µl 200-500 µl
*Il s'agit de valeurs types, mais elles sont très variables et changent en fonction des
composés cibles, de la matrice et de la concentration.
POLYMÈRE
Pour plus de détails sur le
développement de méthodes pour
chaque phase et pour déterminer
les volumes corrects pour d'autres
applications, consultez les notes
techniques et d'application, page
www.agilent.com/chem/SampliQ
.
L'utilisation des phases SampliQ polymère est aisée
grâce à leurs mécanismes de rétention en mode mixte.
10
Les cartouches SampliQ OPT Agilent (Technique Polymère Optimisée)
sont appropriées pour une large gamme d'échantillons, comprenant des acides
faibles, des composés neutres et des bases faibles. Les cartouches SampliQ OPT
utilisent une nouvelle chimie des polyamides (brevet en cours) : les cartouches
OPT sont compatibles avec l'eau et la plupart des solvants organiques ainsi
qu'avec les solvants acides et basiques d'un pH compris entre 0 et 14. Grâce à
son caractère à la fois hydrophile et lipophile, cette résine s'avère efficace pour
retenir aussi bien les composés polaires que non polaires.
Le mécanisme de rétention principal dans les cartouches OPT est la phase
inverse, ce qui simplifie le développement de méthodes et la compatibilité pour
les séparations par CPG et CPL.
SampliQ OPT
Description Unité Référence
30 mg, 1 ml 100/pqt 5982-3013
60 mg, 3 ml 50/pqt 5982-3036
150 mg, 6 ml 30/pqt 5982-3067
Plaque à 96 puits, 10 mg 5982-3096
Pour les composés hydrophiles qui ne sont pas retenus efficacement par l'OPT,
essayez de modifier la charge et le solvant de rinçage en réglant le pH pour
l'adapter au pKa du composé faiblement retenu. Pour les composés trop
fortement retenus, essayez d'ajouter de l'acide formique à 1 % à l'éluant
méthanol.
Chimie des polyamides
SampliQ OPT Agilent : Votre option SPE la plus polyvalente
POLYMÈRE
Contrairement aux phases à base de silice, les cartouches OPT donnent
exactement les mêmes résultats si elles sèchent accidentellement durant l'étape
de conditionnement.
N
R
R
R
O
11
Dans cette étude, vous pouvez voir que les cartouches SampliQ OPT obtiennent la même précision en termes de récupération et de
reproductibilité (coefficients de variation indiqués sous forme de segments) aussi bien par voie humide que sèche. Pour des explications
détaillées, veuillez vous référer à la note technique SampliQ OPT (publication Agilent 5989-8869EN).
Acétaminophène Chlorhydrate de
propanolol
Bromphéniramine Miansérine Doxépine
chlorhydrate
Fluoxétine Dihydroxynaphtalène
% de récupération
Sec
Humide
Comparaison de la rétention des composés extraits avec des cartouches SampliQ OPT
Agilent sèches et humides.
POLYMÈRE
140
120
100
80
60
40
20
0
12
SampliQ SCX
Description Unité Référence
30 mg, 1 ml 100/pqt 5982-3213
60 mg, 3 ml 50/paq 5982-3236
150 mg, 6 ml 30/paq 5982-3267
Pour la phase silice SCX, voir page 25.
Polymère divinylbenzène modifié par
l'acide sulfonique
La résine polymère échangeuse de cations forts (SCX) Agilent SampliQ est un
polymère mixte de divinylbenzène modifié par un acide sulfonique présentant des
propriétés de rétention par échange d'ions et en phase inverse. En conséquence,
la résine SampliQ SCX présente une excellente rétention des composés basiques
et neutres dans une large plage d'hydrophilie (log P). De plus, la résine est
résistante à un grand nombre de solvants, est stable dans un intervalle de pH de
0 à 14 et est mouillable par l'eau.
Les cartouches SampliQ SCX Agilent assurent une
extraction rapide et fiable des composés basiques et cationiques.
POLYMÈRE
SO
3
-
R
1
R
2
Loading...