TOYOBO QPK-201, QPK-201T User Manual

10-08

SYBR® Green

Realtime PCR Master Mix

(Code No.QPK-201,QPK-201T)

使用说明书

科研用

TOYOBO CO., LTD. Life Science Department

OSAKA JAPAN

目 录

[1] 前言 .................................................................................................................................................. 1

[2] 本产品的组成 ...............................................................................................................................2

[3] 其他必需品 .................................................................................................................................... 3

[4] 使用方法......................................................................................................................................... 4

[5] 常见问题......................................................................................................................................... 8

[6] 相关产品....................................................................................................................................... 10

【 注意 】

本产品为科研用试剂。请勿作为诊断、临床试剂使用。此外，对于本产品的有

害性调查还不十分全面，因此，在使用时，请严格遵守实验室的一般注意事项，

适当使用保护用品，安全操作。

本产品是在与F. Hoffmann-La Roche Ltd.、Roche Molecular Systems Inc.及The Perkin-Elmer

Corporation的特许合同约定下销售的。

“Purchase of this product is accompanied by a limited license to use it in the Polymerase Chain

Reaction (PCR) process for The Research Field in conjunction with a thermal cycler whose use in

the automated performance of the PCR process is covered by the up-front license fee, either by

payment to Perkin-Elmer or as purchased, i.e., an authorized thermal cycler.”

TM

※LightCycler

※TaqMan

※SYBR

®

是Idaho Technology Inc.和Roche Molecular Systems Inc.的商标。

®

是Roche Molecular Systems Inc.的注册商标。

是Molecular Probes Inc.的注册商标。

※ABI PRISM®是The Perkin-Elmer Corporation的注册商标。

[1] 前言

本产品是在 Taq DNA polymerase 基础上开发的通用性很高的 Realtime PCR

用 2×浓度的预混液，已包含除引物和样品 DNA 以外的所有组分。适用于以

cDNA、DNA 为样品的SYBR® Green Ⅰ掺入法检测，可获得重复性良好的结果。

◆本产品特征◆

1．高通用性

本产品适用于各种常见实时定量 PCR 仪：

1）产品中添加了 BSA，能够应用于 Roche 公司的 LightCyclerTM以及其它使

用 Glass Capillary 的分析体系；

2）产品中还添加了 Passive Reference（内含 1×浓度 ROX reference dye），

可应用于 Applied Biosystems 公司的 ABI PRISM®实时定量 PCR 仪。经确认，使用

其它仪器的时候，即使不使用 Passive Reference，也不会对实验本身造成影响。

本说明书仅以 Applied Biosystems 公司的 ABI PRISM®和 Roche 公司的

LightCyclerTM为例进行说明，供使用者参考。对于其他厂家的实时定量 PCR 仪，

请使用者根据仪器说明书，并结合实际情况进行适当调整。

2．快速热启动

为了抑制非特异性反应，本产品中添加了抗 Taq DNA 多聚酶的单克隆抗体进

行热启动。此方法的优点是酶活力的释放极快，在 1 分钟内即可完成预变性。各

循环的变性步骤只需考虑核酸变性所需的时间进行设定即可。

如果使用 LightCyclerTM等高速 PCR 仪，则更能显示出其缩短时间的优越性。

3．操作简便

由于采用了 2×Master Mix 体系，已经把除引物、模板之外的酶、Buffer、 dNTP

等预混在一起，因而减少了操作步骤，既缩短了加样时间，又降低了污染的几率。

<关于 SYBR® GreenⅠ检测体系>

SYBR

®

GreenⅠ检测体系通过 SYBR

并且结合后染料的荧光强度的增强作为指标，进行检测。

Http://www.bio-toyobo.cn

®

GreenⅠ染料与 DNA 的扩增产物结合，

1

东洋纺（上海）生物科技有限公司

虽然该方法和普通的 PCR 反应一样简便，但由于会出现引物二聚体、目的条

带以外的扩增产物等，因此有必要在扩增后对融解曲线进行分析确认。

[2] 本产品的组成

本产品分为两个包装，50μl 反应体系可用 40 次份（QPK-201T）和 200 次

份（QPK-201）。

<QPK-201T>

®

SYBR

<QPK-201>

SYBR® Green Realtime PCR Master Mix 1 ml x 5

Green Realtime PCR Master Mix 1 ml

该组分是包含反应缓冲液、SYBR

®

GreenⅠ、dNTPs、Mg

2+

、Taq DNA聚合酶

及抗Taq单克隆抗体的2×预混液。请添加模板DNA和引物，并用灭菌蒸馏水配制

成1×浓度后再使用。该溶液中已包含1×浓度ROX（Passive reference dye）。

<注意>

本产品原则上在-20℃以下避光冷冻保存。但是，如果在短期内需

持续使用时，可于融解后在4

存时请使用避光箱或产品内配有的铝箔袋。

5支装的QPK-201包装内另外还添附有一个铝箔袋，建议逐支融解

使用。融解后，于4℃状态保存，并尽量在3周内使用完毕。融解后的

产品短期内不用时，请装入原包装袋，再次于-20℃状态下进行避光冷

冻保存。（本公司经实验确认，反复冻融20次对产品质量没有明显影

℃避光保存，此时最长可保存2个月。保

响。）

为保证实验效果，请在收到产品的一年之内使用完毕。

垂询电话：[phone]

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