SacI D6593 technology data

SacI

产品编号 产品名称 包装

D6593 SacI 500U

产品简介：

¾ SacI内切酶为进口分装，基本信息如下：

识别序列 缓冲液兼容性(%) 酶切温度 失活条件 甲基化干扰？

GAGCT^C

^

C

TCGAG

¾ 酶储存液组成为：10mM Tris-HCl (pH7.4 at 25℃)，100mM KCl，1mM DTT，1mM EDTA，0.2mg/ml BSA and 50%

glycerol。

¾ 1X Buffer SacI 组成为：10mM Bis-Tris Propane-HCl (pH6.5 at 37℃)，10mM MgCl
¾ 1X Buffer Y组成为：33mM Tris-acetate (pH7.9 at 37℃)，10mM magnesium acetate，66mM potassium acetate，0.1mg/ml

BSA。

¾ 酶切和连接效率：50倍过量的本内切酶消化1小时，>95％被酶切的片段可以被连接并被重新酶切(recut)。
¾ 活性单位定义：在37℃，50微升反应体系中反应1小时，将1微克的λ DNA完全分解的酶量定义为1个活性单位，即1U。

1X SacI 1X B 1X G 1X O 1X R 1X Y 2X Y

100 50-100 20-50 0-20 0-20 50-100 20-50

37℃

，0.1mg/ml BSA。

2

65℃

20min

无

包装清单：

产品编号 产品名称 包装

D6593-1 SacI (10U/µl) 500U

D6593-2 10X Buffer SacI 150µl

D6010Y 10X Buffer Y 1ml

－ 说明书 1份

保存条件：

-20℃保存。

注意事项：

¾ 内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
¾ 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

1. 单酶切时可以参考如下反应体系进行：。
待酶切DNA 不超过1µg

双蒸水或MilliQ水 适量

10X Buffer SacI 2µl

SacI 0.5-1µl

总体积 20µl

37℃孵育1小时或更长时间

说明：请注意把Buffer和水等充分混匀后再加入内切酶，加入内切酶后可以用枪吹打或轻轻Vo r t e x 混匀。通常参考上述条
件孵育1小时已经足够，但多孵育数小时甚至孵育过夜也不会产生负面影响。如果酶切较长时间甚至酶切过夜，可以使用
更少量的酶。待酶切DNA量较大时，可以适当延长酶切时间或按比例放大酶切体系。

2. 双酶切或多酶切时，需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液，然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的

缓冲液可以选择，可以在一种酶消化完毕后进行纯化，纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。