Roth 3463, 3464, 3466 User guide

Gebrauchsanweisung

Neisser-Lösungen I-III

Best.-Nr.: 3463; 3464; 3466

Mikrobiologische Färbung zur Darstellung von Diphteriebakterien

Mit der Neisser-Färbung lassen sich bestimmte Plasmabestandteile - sog. Polkörperchen (metachromatische
Granula) - darstellen. Sie sind typisch für einige Gram-positiven Bakterien, insbesondere das Diphtheriebakterium
(Corynebacterium diphtheriae). Die Neisser-Färbung spielt somit eine wichtige Rolle beim Nachweis von
Diphtherie.

Man verwendet luftgetrocknete, hitzefixierte Ausstriche von klinisch-zytologischem Material wie Sputum, Eiter,
Ergüssen etc.

Die Färbung erfolgt in zwei Schritten:
Zunächst werden die Polkörperchen dargestellt mit einer Mischung aus den Lösungen I und II, anschließend der
Bakterienkörper durch Gegenfärbung mit Lösung III.

Reagenzien:

 Neisser-Lösung I 3463.1 100 ml

(Methylenblau-Lösung) 3463.2 500 ml

 Neisser-Lösung II 3464.1 100 ml

(Kristallviolett-Lösung) 3464.2 500 ml

Gebrauchslösung:
Methylenblau-Kristallviolett-Lösung - erst kurz vor Gebrauch herstellen:
2 Teile Neisser-Lösung I
1 Teil Neisser-Lösung II

 Neisser-Lösung III 3466.1 100 ml

(Chrysoidin-Lösung) 3466.2 500 ml

Durchführung:

Für luftgetrocknete, hitzefixierte Ausstriche.

1. Färben mit Methylenblau-Kristallviolett-Lösung.

30 sec

3. Gegenfärben mit Neisser-Lösung III.

1 min

Ergebnis: Polkörperchen: dunkelbraun bis schwarz; Bakterienkörper: bräunlich

Hinweis: Die Farbintensität ist abhängig von der Vorbehandlung und Beschaffenheit der zu färbenden Probe.
Eine Anpassung der Methode an die jeweiligen Bedingungen kann also ggf. erforderlich sein.

n Achtung H371-H412

Neisser-Lösung I 100 ml 3463.1
500 ml 3463.2

Neisser-Lösung II 100 ml 3464.1
500 ml 3464.2

Neisser-Lösung III 100 ml 3466.1
500 ml 3466.2

SDB-Version:21.10.2021

2. Kurz spülen mit Aqua dest.

4. Kurz spülen mit Aqua dest.
Präparat zwischen Filterpapier trocknen.

Carl Roth GmbH + Co. KG

Schoemperlenstraße 3-5 • 76185 Karlsruhe
Postfach 100121 • 76231 Karlsruhe
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[e-mail] • www.carlroth.de sse 06/2021

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Instructions for use

Neisser’s Solutions I-III

Art. No.: 3463; 3464; 3466

Microbiological staining method for visualising diphtheria bacteria

The Neisser staining is used for detection of special ingredients of cytoplasm – so-called polar nuclei
(metachromatic granules) - typically for some Gram positive bacteria, especially diphtheria bacteria
(Corynebacterium diphtheriae). Therefore, Neisser staining is very important for diagnosis of diphtheria.

For use with air-dried, heat-fixed smears of various cytological materials such as sputum, pus etc.

The staining is carried out in two steps:
First the polar nuclei are stained with a mixture of Neisser’s solutions I and II.
Then the bacterium body is counterstained with Neisser’s solution III.

Reagents:

 Neisser’s solution I 3463.1 100 ml

(Methylen blue solution) 3463.2 500 ml

 Neisser’s solution II 3464.1 100 ml

(Crystal violet solution) 3464.2 500 ml

Working solution
Methylen blue Crystal violet solution - mix prior to use:
2 parts Neisser’s solution I
1 part Neisser’s solution II

 Neisser’s solution III 3466.1 100 ml

(Chrysoidine solution) 3466.2 500 ml

Instructions:

For air-dried, heat-fixed smears.

1. Stain with Methylen blue Crystal violet solution.

30 sec

3. Counterstain with Neisser’s solution III.

1 min

Result: Polar nuclei: dark brown to black; bacterium body: brownish

Note: The colour intensity depends on the pre-treatment and the composition of the samples to be stained.
It may initially be necessary to adapt the method to the respective conditions.

n Warning H371-H412

Neisser’s solution I 100 ml 3463.1
500 ml 3463.2

Neisser’s solution II 100 ml 3464.1
500 ml 3464.2

Neisser’s solution III 100 ml 3466.1
500 ml 3466.2

2. Wash briefly with aqua dest.

4. Wash briefly with aqua dest.
Dry between sheets of filter paper.

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SDB-Version:21.10.2021