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Gebrauchsanweisung
Mowiol 4-88
Art.-Nr. 0713
Mowiol 4-88 ist ein farbloses bis leicht
gelbliches Granulat. Es handelt sich um
einen teilhydrolysierten Polyvinylalkohol,
der auf Grund seiner hohen Klebkraft
vielfache Anwendung in der
Klebstoffindustrie findet.
In der Histologie wird Mowiol 4-88 als
wasserlösliches Einbettmittel zur
Herstellung von Dauerpräparaten
eingesetzt. Man verwendet es hier
üblicherweise zusammen mit dem
Antibleichmittel DABCO (1,4-Diazabicyclo(2,2,2)octan), um ein Ausbleichen der
Proben zu verhindern.
Vorschrift zur hydrophilen
Einbettung mit Mowiol 4-88
Zutaten:
6,0 g Glycerin (Best.-Nr. 3783)
2,4 g Mowiol 4-88
6,0 ml destilliertes Wasser, steril
(Best.-Nr. T143)
12,0 ml 0,2 M Tris-HCl (pH 8,5)
(Best.-Nr. 9090)
25 mg pro ml DABCO
Lösung (Best.-Nr. 0718)
(optional)
Herstellung:
1. 6,0 g Glycerin mit 2,4 g Mowiol
mischen. Eine Stunde unter Rühren
bei Raumtemperatur (RT) lösen.
2. 6,0 ml Wasser zugeben und eine
weitere Stunde bei RT rühren.
3. 12,0 ml 0,2 M Tris-HCl (pH 8,5)
zugeben und zwei Stunden bei 50 °C
inkubieren. Während dieser Zeit alle
20 Minuten für 2 Minuten auf dem
Magnetrührer mischen.
4. Man beachte: In vielen Fällen löst sich
Mowiol nicht vollständig. Wir
empfehlen folgenden Schritt:
Zentrifugation für 15 Minuten
bei 5000 g Überstand verwenden.
5. Optional: Anschließend noch pro ml
Lösung 25 mg DABCO zugeben und
lösen, bis eine klare Lösung
entstanden ist.
6. Lösung in 1,5 ml- oder 2 mlReaktionsgefäße aliquotieren und
bei -20 °C lagern.
Verwendung:
Die Mowiol- oder Mowiol/DABCOAliquots werden aufgetaut und
anschließend sofort auf Eis gestellt.
Man beachte: Ein Aliquot kann
maximal 2x aufgetaut werden,
danach ist die Lösung zu verwerfen!
Das einzubettende Präparat wird auf
dem Objektträger vorbereitet. Eventuell
vorhandene Pufferlösung sollte
möglichst vollständig entfernt werden,
ohne allerdings das Präparat trocken
fallen zu lassen.
50-100 µl Mowiol oder
Mowiol/DABCO
luftblasenfrei auf ein
Deckglas geben – am
besten in Form eines
„T“. Das Deckglas auf
den Objektträger
bringen und vorsichtig
und luftblasenfrei absenken (s. Abb.1).
Präparate über Nacht aushärten lassen.
Vollständig ausgehärtete Präparate
können bei RT aufbewahrt werden.
Abb. 1
Mit der benetzten Seite nach unten wird
das Deckglas vorsichtig auf den
Objektträger abgesenkt. Dabei sollte der
Querstrich des „T“ nach unten zeigen, um
das Einbettmedium möglichst optimal auf
dem Präparat zu verteilen.
Mowiol 0713.1 50 g
0713.2 100 g
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Mowiol 4-88
Art. No. 0713
Mowiol 4-88 consists of colourless to light
yellow granules. It is a partly hydrolysed
polyvinyl alcohol with high adhesive
power, which is principally used in industry
working with adhesives.
In histology Mowiol 4-88 is used as
hydrophilic mounting medium. Usually it is
applied in combination with the antibleaching reagent DABCO (1.4Diazabicyclo-(2.2.2)octane), which
conserves the colours and the
fluorescence of durable preparations.
Instruction for hydrophilic
embedding with Mowiol 4-88
Ingredients:
6.0 g Glycerol (Art. No.
3783)
2.4 g Mowiol 4-88
6.0 ml distilled water, sterile
(Art. No. T143)
12.0 ml 0.2M Tris-HCl (pH 8.5)
(Art. No. 9090)
25 mg per ml DABCO
solution (Art. No. 0718)
(optional)
Preparation:
1. Mix 6.0 g Glycerol with 2.4 g Mowiol
and dissolve with frequent agitation for
one hour at room temperature (RT).
2. Add 6.0 ml water and stir for one more
hour at RT.
3. Add 12.0 ml 0.2 M Tris-HCl (pH 8.5)
and incubate for two hours at 50 °C
under periodical stirring (every 20
minutes for 2 minutes).
4. Note: In many cases Mowiol does not
dissolve completely. We recommend
centrifugation for 15 minutes at 5000
g. Continue with the supernatant.
5. Optional: Subsequently, add 25 mg
DABCO per ml solution and dissolve
until a clear solution is obtained.
6. Pour the medium into 1.5 ml- or 2 mltubes and store at -20 °C.
Application:
Thaw a Mowiol- or Mowiol/DABCOaliquot and keep it on ice until use.
Note: Mowiol/DABCO-aliquots
should undergo 2 cycles of freezeand-thaw in maximum.
Apply the tissue specimen onto the
slide and remove the excessive buffer.
Don’t allow the sample to fall dry.
Pipet 50-100 µl
Mowiol or
Mowiol/DABCO
without bubbles onto
a cover slip –
preferably forming a
„T“. Apply the cover
slip bubble-free to the
slide by lowering with caution (s. Fig.1).
Let the samples harden over night.
Completely hardened specimens can
be stored at room temperature.
Fig. 1
Lower the cover slip wet side down onto
the slide starting at the cross of the „T”, in
order to disperse the embedding medium
optimally.
Mowiol 0713.1 50 g
0713.2 100 g
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