GeneCopoeia u10111A User Guide

使用说明书

E.coli Competent Cells JM109

产品套装编号：U0111A

GeneCopoeia

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GeneCopoeia Inc.
19520 Amaranth Drive
Germantown, Maryland 20874
USA
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Fax: [phone]
Web: www.genecopoeia.com

TM

产品内容

Competent Cells JM109
Control DNA（pUC19，10 pg/µl）

产品编号

U01110A
V01010A

包装规格

100 μl×10
50 μl×1

储存条件：-80℃保存 保存时间： 12月

产品概述

■

粒DNA等。在进行基因重组实验时，使用感受态细胞的转化实验应用十分广泛。在制作基因文库、重
组质粒体以及进行亚克隆实验时，特别是在目的基因含量十分低的情况时，使用高效的感受态细胞显
得十分重要。

Genotype

■

F’[traD36，proAB+，lacIq

细胞种类

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生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β-半乳糖苷酶活性，由此很容
易鉴别重组体菌株。

转化效率

■

产生的菌落数＞1×108 转化子/1 µg pUC19

：

感受态细胞（Competent Cells）是一种具有摄入外源DNA能力的受容菌，它可以摄取外源的质

：

re c A1 ， e nd A 1， g y rA 9 6，t h i-1， h sd R 1 7， s upE 4 4， r elA 1 ，Δ ( l ac － pr o A B) /

，lacZΔM15]

：

该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产

：

使用1 ng的质粒DNA进行转化时：100 µl Competent Cells TOP10/1 ng pUC19 进行转化时

使用步骤

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：

1. 把感受态细胞置于冰中解冻；

2. 把50-100 µl的感受态细胞移至灭菌处理的试管内；

3. 加入用于转化的DNA或反应产物（10 ng以下）；

4. 冰中放置30分钟；

5. 42℃ 放置30～60秒；

6. 冰中放置2～3分钟；

7. 加入37℃预温好的SOC培养基，使终体积为1 ml；

8. 37℃振荡培养1小时（160～225 rpm）；

9. 取适量涂布琼脂平板培养基；

10. 37℃过夜培养。

注意事项

■

：

1. 请务必用干冰运输；

2. 非立即使用的感受态细胞请在-80℃下保存（融化后的感受态细胞不能再冻结保存）；

3. 感受态细菌在冰上融化，应立刻做转化实验，放置太久容易使之沉淀。

4. 因为感受态细菌对温度的改变和剧烈的震动敏感，所以必须轻微的处理感受态细菌，加
入DNA后，避免使用枪头剧烈的混匀;

5. 转化时请使用传热性能较好的试管。一般的1.5 ml微型离心管也可使用，但转化效率会

有所下降；

6. 对60 µl的感受态细胞，用于转化的质粒DNA量请控制在10 ng以下，并保证DNA 溶液
的体积在20 µl以下。否则会影响转化效率；

7. 使用SOC培养基的地方也可使用 LB 培养基，但此时转化效率会有所下降；

8. 包装中附有10 pg/µl的pUC 19 DNA，供作对照实验使用。

该产品仅限于实验科学研究用，若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途，本公司概不承
担任何责任。

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