使用说明书
E.coli Competent Cells BLR(DE3)plysS
产品套装编号:U0109A
GeneCopoeia
Expressway to Discovery
GeneCopoeia Inc.
19520 Amaranth Drive
Germantown, Maryland 20874
USA
Tel: 301-515-6982; 1-866-360-9531
Fax: 301-515-6983
Web: www.genecopoeia.com
TM
产品内容
Competent Cells BLR(DE3)plysS
Control DNA(pUC19,10 pg/µl)
产品编号
U01090A
V01010A
包装规格
100 μl×10
50 μl×1
储存条件:-80℃保存 保存时间: 12月
产品概述
■
量,有更高的转化效率,达到1×108cfu/ug超螺旋DNA,并容易获得高质量的质粒DNA。
■ 贮存:
Genotype
■
转化效率
■
产生的菌落数>1×108 转化子/1 µg pUC19
使用步骤
■
:
BL21-Gold{DE3}感受态细胞具有BL21(D[3]感受态细胞的特性,同时能大大提高表达蛋白的产
-70℃
:
-
F-ompT hsdSB(rB-mB
:
使用1 ng的质粒DNA进行转化时:100 µl Competent Cells TOP10/1 ng pUC19 进行
:
1. 把感受态细胞置于冰中解冻;
2. 把50-100 µl的感受态细胞移至灭菌处理的试管内;
3. 加入用于转化的DNA或反应产物(10 ng以下);
4. 冰中放置30分钟;
5. 42℃ 放置30~60秒;
6. 冰中放置2~3分钟;
7. 加入37℃预温好的SOC培养基,使终体积为1 ml;
8. 37℃振荡培养1小时(160~225 rpm);
9. 取适量涂布琼脂平板培养基;
10. 37℃过夜培养。
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转化时
注意事项
■
:
1. 请务必用干冰运输;
2. 非立即使用的感受态细胞请在-80℃下保存(融化后的感受态细胞不能再冻结保存);
3. 感受态细菌在冰上融化,应立刻做转化实验,放置太久容易使之沉淀;
4. 因为感受态细菌对温度的改变和剧烈的震动敏感,所以必须轻微的处理感受态细菌,加
入DNA后,避免使用枪头剧烈的混匀;
5. 转化时请使用传热性能较好的试管。一般的1.5 ml微型离心管也可使用,但转化效率会
有所下降;
6. 对60 µl的感受态细胞,用于转化的质粒DNA量请控制在10 ng以下,并保证DNA 溶液
的体积在20 µl以下。否则会影响转化效率;
7. 使用SOC培养基的地方也可使用 LB 培养基,但此时转化效率会有所下降;
8. 包装中附有10 pg/µl的pUC 19 DNA,供作对照实验使用。
该产品仅限于实验科学研究用,若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途,本公司概不承
担任何责任。
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