GeneCopoeia E.coli Competent Cells stbl3 User Guide

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TM

E.coli Competent Cells stbl3

TM

产品套装编号：U0103A

产品内容

Competent Cells stbl3
Control DNA（pUC19，10 pg/µl）

产品编号

U01030A
V01010A

包装规格

100 μl×10
100 μl×1

储存条件：-80℃保存 保存时间： 12月

产品概述

■

等较大的质粒转化的效果好，有效减低错误重组的可能性。

Genotype

■

(Strr )

细胞种类

■

病毒和其他反转录病毒载体的复制。此外，细胞非常稳定，能提高慢病毒载体或其他不稳定载体的克
隆效率。

：

常规质粒制备的宿主菌，可进行蓝白斑筛选；复制慢病毒载体系统推荐使用的菌株，对慢病毒载体

：

mcrB mrr hsd

F-

xyl

-5 - leu mtl-1.

：

大肠杆菌Stbl3™菌株能有效地抑制长片段末端重复区的重组，非常适合于含有同向重复序列

S20 (rB-, mB- )

rec

A13

sup

E44

ara

-14

gal

K2

lac

Y1

pro

A2 rpsL20

的慢

转化效率

■

：

使用1 ng的质粒DNA进行转化时：
100 µl Competent Cells Stbl3/1 ng pUC19 进行转化时产生的菌落数
＞1×10

8

转化子/1 µg pUC19

使用步骤

■

注意事项

■

：

1. 把感受态细胞置于冰中解冻。

2. 把50-100 µl的感受态细胞移至灭菌处理的试管内。

3. 加入用于转化的DNA或反应产物（10 ng以下）。

4. 冰中放置30分钟。

5. 42℃ 放置30～60秒。

6. 冰中放置2～3分钟。

7. 加入37℃预温好的SOC培养基，使终体积为1 ml。

8. 37℃振荡培养1小时（160～225 rpm）。

9. 取适量涂布琼脂平板培养基。

10. 37℃过夜培养。

：

1. 请务必用干冰运输。

2. 非立即使用的感受态细胞请在-80℃下保存（融化后的感受态细胞不能再冻结保存）。

3. 感受态细菌在冰上融化，应立刻做转化实验，放置太久容易使之沉淀。

4. 因为感受态细菌对温度的改变和剧烈的震动敏感，所以必须轻微的处理感受态细菌，加
入DNA后，避免使用枪头剧烈的混匀。

5. 转化时请使用传热性能较好的试管；一般的1.5 ml微型离心管也可使用，但转

有所下降。

6. 对60 µl的感受态细胞，用于转化的质粒DNA量控制在10 ng以下，并保证DNA溶液的
体积在20 µl以下。否则会影响转化效率。

7. 使用SOC培养基的地方也可使用 LB培养基，但此时转化效率会有所下降。

8. 包装中附有10 pg/µl的pUC 19 DNA，供作对照实验使用。

化效率会

该产品仅限于实验科学研究用，若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途，本公司概不承
担任何责任。

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