GeneCopoeia E.coli Competent Cells BL21 DE3 User Guide

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TM

E.coli Competent Cells BL21（DE3

）

产品套装编号：U0105A

产品内容

Competent Cells BL21（DE3）
Control DNA（pUC19，10 pg/µl）

产品编号

U01050A
V01010A

包装规格

100 μl×10
100 μl×1

储存条件：-80℃保存 保存时间： 12月

产品概述

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胞，可用于DNA的化学转化。

Genotype

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细胞种类

■

码T7RNA聚合酶基因，可在 IPTG（安慰型诱导物）可作用于下，被正调控诱导表达，使得T7RNA
聚合酶大量表达（普通大肠杆菌无这种RNA聚合
的T7启动子，促进下游外源的目的片段的转录，进而间接促进外源蛋白的表达。因此该菌株是一个高
效表达宿主，适合表达非毒性蛋白。

：

BL21（DE3）感受态细胞是采用大肠杆菌BL21（DE3）菌株经特殊工艺处理得到的感受态细

：

ompT hsd

F-

：

BL21(DE3)是改造过的专门用来表达T7启动子启动基因的表达用大肠杆菌菌株。该菌株中DE3编

SB（rB-mB－）

gal dcm

（DE3）.

酶，进而T7RNA聚合酶作用于外源表达质粒载体上

转化效率

■

：

使用1 ng的质粒DNA进行转化时：
100 µl Competent Cells BL21(DE3)/1 ng pUC19 进行转化时产生的菌落数＞1×10
子/1 µg pUC19

7

转化

使用步骤

■

注意事项

■

：

1. 把感受态细胞置于冰中解冻。

2. 把50-100 µl的感受态细胞移至灭菌处理的试管内。

3. 加入用于转化的DNA或反应产物（10 ng以下）。

4. 冰中放置30分钟。

5. 42℃ 放置30～60秒。

6. 冰中放置2～3分钟。

7. 加入37℃预温好的SOC培养基，使终体积为1 ml。

8. 37℃振荡培养1小时（160～225 rpm）。

9. 取适量涂布琼脂平板培养基。

10. 37℃过夜培养。

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1. 请务必用干冰运输。

2. 非立即使用的感受态细胞请在-80℃下保存（融化后的感受态细胞不能再冻结保存）。

3. 感受态细菌在冰上融化，应立刻做转化实验，放置太久容易使之沉淀。

4. 因为感受态细菌对温度的改变和剧烈的震动敏感，所以必须轻微的处理感受态细菌，加
入DNA后，避免使用枪头剧烈的混匀。

5. 转化时请使用传热性能较好的试管。一般的1.5 ml微型离心管也可使用，但转

有所下降。

6. 对60 µl的感受态细胞，用于转化的质粒DNA量请控制在10 ng以下，并保证DNA 溶液
的体积在20 µl以下。否则会影响转化效率。

7. 使用SOC培养基的地方也可使用 LB 培养基，但此时转化效率会有所下降。

8. 包装中附有10 pg/µl的pUC 19 DNA，供作对照实验使用。

化效率会

该产品仅限于实验科学研究用，若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途，本公司概不承
担任何责任。

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