GeneCopoeia E.coli Competent Cells User Guide

使用说明书

E.coli Competent Cells 2T1

产品套装编号：U0104A

GeneCopoeia

Expressway to Discovery

GeneCopoeia Inc.
19520 Amaranth Drive
Germantown, Maryland 20874
USA
Tel: [phone]
Fax: [phone]
Web: www.genecopoeia.com

TM

产品内容

Competent Cells 2T1
Control DNA（pUC19，10 pg/µl）

产品编号

U01040A
V0101A

储存条件：-80℃保存 保存时间： 12月

产品概述

■

Genotype

■

φ80(

pan

细胞种类

■

转化效率

■

：

大肠杆菌2-T1菌株是克隆实验中理想的菌株，具有许多优点；这些优点包括：

1. 自身具有四环素抗性基因（Tet

2. 高的转化效率（大于1x10

mcr

A,

3. 去处了

ton

A基因型能够阻止噬菌体T1和T5的感染。

4.

5. 形成菌落时间较其他菌株快（12小时）。

：

pro

F′{

D.

大肠杆菌2T1可以使用IPTG诱导lac启动子表达目的基因。

使用1 ng的质粒DNA进行转化时：

100 µl Competent Cells 2
＞1×10

AB+

lac

Z)∆M15 ∆(

：

：

8

mrr, mcr

lac

Iq

lac

Z∆M15 Tn10(

lac

ZYA-argF) U169

transformants/1 µg pUC19 Plasmid

R

）。

9

cfu/ug DNA）。

BC,和

hsd

RMS等限制性系统，适合构建高质量的基因组文库。

Tet

R) ∆(

ccd

AB)}

mcr

end

A1

rec

A1

sup

E44

T1

/1 ng pUC19 Plasmid进行转化时产生的菌落数

A ∆(

thi

包装规格

100 μl×10
100 μl×1

mrr-hsd

-1

gyr

RMS-

A96

rel

mcr

A1

BC)

ton

A

使用步骤

■

注意事项

■

：

1. 把感受态细胞置于冰中解冻。

2. 把50-100 µl的感受态细胞移至灭菌处理的试管内。

3. 加入用于转化的DNA或反应产物（10 ng以下）。

4. 冰中放置30分钟。

5. 42℃ 放置30～60秒。

6. 冰中放置2～3分钟。

7. 加入500ul 37℃预温好的SOC培养基。

8. 37℃振荡培养1小时（160～225 rpm）。

9. 取适量涂布琼脂平板培养基。

10. 37℃过夜培养。

：

1. 请务必用干冰运输。

2. 非立即使用的感受态细胞请在-80℃下保存（融化后的感受态细胞不能再冻结保存）。

3. 感受态细菌在冰上融化，应立刻做转化实验，放置太久容易使之沉淀。

4. 因为感受态细菌对温度的改变和剧烈的震动敏感，所以必须轻微的处理感受态细菌，加
入DNA后，避免使用枪头剧烈的混匀。

5. 转化时请使用传热性能较好的试管。一般的1.5 ml微型离心管也可使用，但转化效率会

有所下降。

6. 对60 µl的感受态细胞，用于转化的质粒DNA量请控制在10 ng以下，并保证DNA 溶液
的体积在20 µl以下。否则会影响转化效率。

7. 需要使用SOC培养基的步骤也可使用 LB 培养基代替，但转化效率会有所下降。

8. 包装中附有10 pg/µl的pUC 19 DNA，供作对照实验使用。

该产品仅限于实验科学研究用，若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途，本公司概不承
担任何责任。

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