E.coli HB101 Service Manual

E.coli

Electro-Cells

HB101

使 用 说 明 书

Takara Code

D9021

包 装 量

保 存 :

制品说明

Genotype

细胞种类

细胞浓度 :

质量标准

使用方法
质粒 DNA 的转化方法

注意事项

备 注

V2011.07

SOC 培养基的组成

Electro-Cells HB101 50 μl × 10 支
Control DNA（pBR322，0.01 ng/μl） 10 μl × 1 支

用高电压脉冲电流瞬间击穿大肠杆菌，从而使外源DNA转入大肠杆
菌内的转化方法称为电穿孔法。电穿孔法是各种转化方法中效率最
佳的方法之一，比经Ca
在制作基因文库、进行亚克隆时，尤其在转化少量DNA时，特别能
发挥其威力。

supE
rpsL

高效常用宿主菌

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使用十分方便，适合于各种基因重组实验。

1. 使用 10 pg 的质粒 DNA 进行转化时：
50 μl
5×10

2. 50 μ l 的

Ampicillin L-琼脂平板培养基上过夜培养 40 hr 不产生菌落。

1. Electro-Cell（50 μl）使用前在冰中融化。

2. 在融化的 Electro-Cell 中加入 1～2 μl DNA 溶液（当 DNA 溶液

中有盐存在时用乙醇沉淀脱盐）。

3. 将 Electro-Cell 及 DNA 混合液注入到冰中预冷的 0.1 cm 冲击槽

内（Cuvette）。

4. 1.8 KV 电压冲击后，迅速置于冰中冷却，加入 1 ml SOC 培养

基。

5. 37℃振荡培养 1 小时（160～225 rpm）。

6. 取适量涂布琼脂平板培养基。

7. 37℃过夜培养。

1. 一定要用干冰运输。

2. 不立即使用的 Electro-Cell 请在-80 ℃保存（融化后的

Electro-Cell 不能再冻结保存）。

3. 导入分子量较大的 DNA（＞7 kbp）时，转化效率稍低。

4. 使用 SOC 培养基的地方也可使用 LB 培养基，但转化效率会有

所下降。

:

-80℃

2+

处理而获得的感受态细胞的转化效率高。

44，Δ(

mcrC-mrr)，recA

20，

xyl-5，mtl

HB101在基因重组实验起始时便十分常用。遗传性能稳定，

8

transformants/μg pBR322 Plasmid。

-1，

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1～2×1010 Bacteria/ml

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Electro-Cells HB101/10 pg pBR322 Plasmid＞

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13，

ara

-14，

leuB6，thi-

HB101

Electro-Cells HB101 在含有 100 μg/ml 的

proA2，lacY1，galK

1

2，

5. 包装中附有 0.01 ng/μl 的 pBR322 DNA，供作对照实验使用。

6. 50 μl 的电转化细胞中，转化的质粒 DNA 量不能超过 10 ng，否
则效率会下降。

2％ Bacto tryptone

0.5％ Bacto yeast extract
10 mM NaCl

2.5 mM KCl
10 mM MgSO
10 mM MgCl
20 mM Glucose

4

2