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SGC7901/DDP 人胃癌顺铂耐药株
使用说明书
产品编号:HDRC012
本产品仅供科研使用,不得用于临床及诊断使用!
一、组成:
二、客户自备试剂:
1、PBS
2、培养基
3、0.25%(W/V)胰蛋白酶(含 0.53mM EDTA)
三、培养条件
1、培养基:RPMI1640+10%CS+P/S+DDP 1000ng/ml
2、温度:37.0°C
3、气体:空气 95%,CO2 5%
四、培养方法
培养瓶里面的培养液是不含药物的。待细胞长到 70-80%的汇合度时,去掉培养液,加入含 500ng/ml DDP
药物的培养液,放入培养箱,这段时间肯定会有小部分细胞悬浮起来,但是不要紧,通过换液可以去掉,
下面的细胞待长满就可以消化传瓶了,这时可以一直用含药培养液来消化培养细胞,一两代之后可以将药
物浓度提高到 1000ng/ml,含药培养液用于细胞培养都没问题的,冻存的时候就不要在冻存液里面加药物
了。
五、常见问题及解决方案:
1、培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2、 细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶
底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以离心去掉,留 10ml 培养液培养观察,细胞生长至汇合度
80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续
培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。